不同因素对家兔血液凝固的影响
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(浙江中医药大学20xx级xxxxxxxxxx,20xxxxxxxxx)
摘要:目的 以血液凝固时间作为指标,了解对血液凝固影响的因素,加深对生理止血过程的理解。探究各种因素对血液凝固的影响。方法 将家兔颈动脉采血放血,用不同因素(生理盐水、棉花、液体石蜡、冰水、肝素、草酸、肺组织浸液)处理各试管血液,通过测定凝血时间,对比分析各个因素对血液凝固的影响。结果 少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能缩短凝血时间;液体石蜡涂壁、肝素和草酸钾能延长凝血时间。结论 少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能促进凝血;液体石蜡涂壁、肝素和草酸钾能抑制凝血。
关键词 血液凝固;凝血时间;颈动脉;生理盐水;棉花;液体石蜡;冰水;肝素;草酸钾;肺组织浸液 1.材料与方法[1]
1.1实验对象:家免。 1.2验药品:200g/L氨基甲酸乙酯,0.89% NaCl溶液,棉花,石蜡油、冰块,肝(8U/ml),38g/l
草酸钾溶液、肺组织浸液.
1.3实验仪器:兔手术台,注射器,动脉夹,动脉插管,常用手术器材,秒表,试管。试
管架,烧杯(100ml),竹签。
1.4实验方法与步骤
1.4.1用200g/L氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉缓慢注射麻醉。 1.4.2将兔仰卧固定于手术台上。正中切开颈部,分离一侧颈总动脉,远心端用线结扎
阻断血流,近心端夹上动脉夹。用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口,向心方向插入动脉插管,用线结扎使之不易滑动,以备取血之用。 1.4.3取试管7支,编号。按下实验条件准备完毕。
试管1 加入0.89% NaCl溶液0.1 ml(对照管) 试管2 放少许棉花
试管3 用石蜡油润滑整个试管内表面 试管4 置于有冰块的小烧杯中 试管5 加肝素8U 0.1 ml
试管6 加38g/L草酸钾溶液0.1 ml 试管7 加肺组织浸液0.1 ml 1.4.4放开动脉夹,每管加入血液2 ml。 1.4.5每只试管加血2 ml后,即刻开始计时,每隔壁15 s 倾斜一次(30度角左右),
观察血液是否凝固,直到血液成为凝胶状不再流动为止,终止计时。5、6、7号试管加入血液后,用拇指盖住试管口将试管颠倒两次,使血液与药物混合。 1.4.6记录各管凝血时间,即开始计时到终止计时所经历的时间。 2.实验结果
试管
编号 1 2 3
实验条件 0.89% NaCl溶液 放棉花少许 石蜡油涂管内壁
凝血时间(秒)
1184 97 >2252
每管加 2ml血液
4 5 6 7
冰水浴 肝素(8U)0.1 ml 草酸钾0.1 ml 肺组织0.1 ml
>2252 >2252 >2252 61
表2-1
少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能缩短凝血时间;液体石蜡涂壁、低温、肝素和草酸钾能延长凝血时间。 3.讨论与分析
3.1血液凝固的化学本质是溶胶状态的纤维蛋白原转变为凝胶状态的纤维蛋白,催化此反
应的主要是凝血酶。而正常血液中以无活性的凝血酶原形式存在,在一定条件下被激活而成为凝血酶。凝血酶原激活物是由活化的凝血固子与磷脂胶粒和钙形成的复合物。因此,凝血因子的活化是导致血液凝固的触发机制。
3.2加入生理盐水稀释了血液,使单位体积内凝血酶的浓度降低,因此血液凝固时间延长。 3.3棉花给血液凝固提供的粗糙表面,容易使血小板发生黏着、聚集、解体并释放许多凝
血因子和血小板因子;另外棉花含许多带负电荷的植物纤维,也能激活凝血因子XⅡ,启动内源性凝血途径。因此血液凝固时间缩短。
3.4由于石蜡油表面光滑,不易引起血小板黏着,即不易使血小板发挥促进凝血的作用。
另外石蜡油为绝缘体,其把试管表面所带的负电荷覆盖,不利于凝血因子XⅡ的激活, 因此血液凝固时间大大延长。
3.5放置于冰水中的试管,由于低温抑制酶的活性且血液凝固的过程由许多蛋白质酶(主
要是凝血酶)的参与,因此血液凝固时间延长。
3.6在试管内放入肝素,由于肝素是机体内重要的抗凝物质,它主要通过与血浆中的一些
抗凝蛋白,如抗凝血酶Ⅲ结合,加强后者的抗凝作用;此外肝素还能使血管内壁细胞释放凝血抑制物和纤溶酶原激活物,增强纤溶作用。因此血液不会发生凝固。
﹢﹢
3.7在试管中加入草酸钾,它可与[Ca2]发生反应生成草酸钙沉淀而使血液中无[Ca2]。
﹢
由于凝血过程中[Ca2]是重要的凝血因子,其参与了血液凝固的许多环节,当血液中
﹢
没有[Ca2]时血液就不会发生凝固。因此血液不会发生凝固。
3.8肺组织浸出液中含有丰富的凝血因子Ⅲ,易通过外源性途径迅速发生凝血反应,因此
加肺组织浸出液的试管血液凝固发生最快。 4.结论
少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能促进凝血:生理盐水通过稀释凝血酶浓度而促进凝血;肺组织浸液通过外源性途径而促进凝血;棉花通过增加凝血环境的粗糙程度而促进凝血。
液体石蜡涂壁、肝素和草酸钾能抑制凝血:液体石蜡通过降低凝血环境的粗糙程度而抑制凝血;肝素通过增强抗凝血酶活性而抑制凝血;草酸钾通过结合血液中起重要凝血作用的
﹢
[Ca2]而抑制凝血。 5.参考文献
[1]陆源,林国华,杨午鸣 主编。机能学实验教程,第二版。北京科学出版社,2010,106-107. [2]朱大年 主编。生理学,第七版。人民卫生出版社,2009,63.
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