第２６卷第４期 ２０１４年１２月 塔里木大学学报 Ｖ０１．２６ ＮＯ．４ ＤｅＣ．２０１４ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔａｒｉｍ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 文章编号：文章编号：１００９—０５６８（２０１４）０４—０００８—０８ 罗布泊糖霉菌属放线菌系统进化分析 韩晓雪 吕玲玲罗晓霞张利莉 （塔里木大学生命科学学院／新疆生产建设兵团塔里木盆地 生物资源保护利用重点实验室，新疆阿拉尔８４３３００） 摘要为了研究罗布泊糖霉菌属（Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ）放线菌多样性，采用不同盐浓度梯度的５种培养基，共分离到７株Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ 放线菌，其中５株与有效发表菌株相似性在９４．００—９６．５８％，可能代表Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ新物种。通过系统发育分析揭示罗布泊土 壤Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌的多样性，且多数菌株以极高的自展值在Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ科内形成稳定的、独立的分支。结果表明罗布 泊地区不仅具有较多Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌新物种资源，而且还是一个独特的资源类群。这为开发利用这一类微生物资源提供理 论基础和菌种支持。 关键词糖霉菌属；多样性；系统进化分析；罗布泊 文献标识码：Ａ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９—０５６８．２０１４．０４．００２ 中图分类号：Ｑ９３９．１３＋２ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｕｓ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ Ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｌｏｐ Ｎｕｒ Ｈａｎ Ｘｉａｏｘｕｅ Ｌｖ Ｌｉｎｇｌｉｎｇ Ｌｕｏ Ｘｉａｏｘｉａ Ｚｈａｎｇ Ｌｉｌｉ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ／Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｉｎ Ｔａｒｉｍ Ｂａｓｉｎ ｏｆ Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ＆Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｃｏｒｐｓ，Ｔａｒｉｍ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｌａｒ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ ８４３３００） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｓｏｉｌ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｈｙｐｅｒｓａｌｉｎｅ ｈａｂｉｔａｔ ｉｎ Ｌｏｐ Ｎｕｒ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｓｅｖｅｎ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｓｔａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏ— ｌａｔｅｄ ｂｙ ｆｉｖｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｔｅｎｔ ｓａｌｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｇｒａｄｉｅｎｔ．Ｆｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅｍ ｓｈｏｗｅｄ ９４．００—９６．５８％ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｔｏ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｎ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ａｎｄ ｍａｙ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｎｏｖｅｌ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｈｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ａ ｈｉｇｈ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｌｏｐ Ｎｕｒ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｔｈｅ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ａｎｄ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ｔｈｉｓ ｋｉｎｄ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ；ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｌｏｐ Ｎｕｒ 罗布泊位于新疆塔里木盆地东部，曾是我国第 二大内陆湖，现已干涸。罗布泊地区常年干旱，日照 养的优势类群，并且发现８个新物种；非培养结果发 现，糖霉菌属（Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ）为罗布泊地区优势菌 强度强，昼夜温差大，夏季气温高达７１ ｃｌＣ，为一望无 际的戈壁滩，被视为“生命禁区＿１ Ｊ＇’。２０１２年，关统 群，打破了人们对环境中链霉菌为放线菌优势菌群 的常规认识 Ｊ。 伟对罗布泊地区土壤放线菌非培养和可培养多样性 进行了研究。可培养发现１８个属的放线菌，其中放 线多孢菌属（Ａｃｔｉｎｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ）是罗布泊盐湖中纯培 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ为糖霉菌科（Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ）典型 属，１９９７年由Ｓｔａｃｋｅｂｒａｎｄｔ等人根据１６Ｓ ｒＲＮＡ序列 相似性提出 ］，是糖霉菌科中最大的一个属，包括 收稿日期：２０１３—０９—２７ 作者简介：韩晓雪（１９８９一），女，汉族，２０１１级硕士研究生，主要从事极端放线菌资源研究。 通讯作者 Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｈ￣ｎｇ６３ｌｙｌｙ＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ．ｃｎ Ｅ—ｍａｉｌ：ｈａｎｘｘ０９０３＠１６３．ｃｏｒｎ 第４期 韩晓雪等：罗布 白糖霉菌属放线菌系统进化分析 ９ １ １个有效发表的种，Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ作为该 １．１．１样品来源及处理 科的模式种［４］。Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌均分离自植物或 ２０１０年从新疆罗布泊采集土壤样品。样品采 土壤，除Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ分离自极端特殊环 集后装于无菌的自封袋中，运抵实验室后保存在一 境，可耐受１０％盐浓度外，其余种都分离自普通环 ２０℃冰箱中。 境［４－ｉｏ］。迄今为止，罗布泊Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ多样性的研 土壤样品自然风干，称取２ ｇ土壤样品放人１８ 究鲜有报道。本研究以新疆罗布泊地区土壤样品为 ｍＬ的无菌１５．０６％ＮａＣ１溶液中，加人无菌玻璃珠， 材料，使用５种培养基，共分离到７株Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放 ３７￣Ｃ充分振荡１ ｈ，制成１０—１悬浊液。 线菌，将分离得到的Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌菌株通过 根据《土壤农化分析》 中的方法测定土壤离 １６Ｓ ｒＤＮＡ测序，利用系统发育分析，以期揭示罗布 子含量，见表１。表１显示，罗布泊土壤样品总盐含 泊土壤Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌的多样性，为开发利用这 量为１５．０６％，可溶性总盐含量很高，主要阳离子为 一类微生物资源提供理论基础和菌种支持。 Ｎａ ，其次为Ｋ ；主要阴离子为ｃｌ一，其次为ｓＯ 一， １材料与方法 可推测ＮａＣＩ为主要盐分组成。 １．１材料 表１ 罗布泊土壤样品理化性质鉴定结果 １．１．２主要仪器和试剂 上放线菌形态不同的单菌落转接到相应盐浓度的纯 ＰＣＲ仪：德国ＳｅｎｓｏＱｕｅｓｔ Ｌａｂｃｙｅｌｅｒ；凝胶成像系 化培养基ＩＳＰ一４上。 统：美国ＢＩＯ—ＲＡＤ；高速离心机：德国Ｅｐｐｅｎｄｏｆｆ。 １．４ ＤＮＡ的提取、菌株鉴定及其系统发育分析 ＰＣＲ扩增全套试剂购自广州东盛生物科技有 采用ＳＤＳ—ＣＴＡＢ法提取菌株ＤＮＡ＿１ ，选取细 限公司；限制性内切酶ＨａｅＩＩＩ，连接试剂盒ｐＭＤ１８一 菌１６Ｓ ｒＲＮＡ通用引物２７Ｆ（５ 一ＡＧＡＧｑＴＦＧＡＴＣＣＴ－ Ｔ购自ＴａＫａＲａ。其他生化试剂均为国产分析纯。 ＧＧＣＴＣ一３ ），１４９２Ｒ（５ 一ＣＧＧＣＴＡＣＣＴＦＧＴ－ １．２培养基 ＴＡＣＧＡＣＴＦ一３ ）进行扩增。将ＰＣＲ扩增产物纯化 分离培养基：（１）甘油精氨酸培养基（Ｇ—Ｊ）¨ Ｊ 后进行测序。测序结果在ＧｅｎＢａｎｋ数据库中通过 （２）甘露醇酸水解酪蛋白培养基（ＧＷ１）¨ （３）高氏 ＢＬＡＳＴ程序进行相似性比对，构建系统进化树。用 一号培养基（ＧＳＡ）（４）淀粉酸水解酪蛋白培养基 ＭＥＧＡ ５．１ Ｂａｔｅ２软件进行多序列比对，并采用邻接 （ＳＣＫ）ｎ （５）甘油天冬氨酸培养基（Ｃ１） ］。 法（Ｎｅｉｇｈｂｏｒ—ｊｏｉｎｉｎｇ）构建系统发育树。 １．３菌株的分离与纯化 １．５抗菌活性 利用上述培养基，分别设置１．５％、５％、１０％、 牛津杯法又称管蝶法¨ 引。以金黄色葡萄球 １５％和２０％五个盐浓度梯度，采用稀释平板涂布法 菌，表皮葡萄球菌，大肠杆菌和白色念珠菌为靶标菌 进行分离。培养基加入重铬酸钾以抑制细菌和霉菌 （表２）。以Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌发酵液为原料，筛选 的生长。３７℃恒温培养３周，再挑取分离培养平板 菌株抗菌活性。 １２ 塔里木大学学报 第２６卷 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ内进行多重序列比对，采用邻接法 （Ｎｅｉｇｈｂｏｒ—ｊｏｉｎｉｎｇ）构建系统发育树，如图３所示。 ——— ＿一 Ｏ港ｌ 图３ 罗布泊地区Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ菌株系统发育树 由图３可见，菌株ＴＲＭ ４９１１７、ＴＲＭ ４９１３６、 菌株ＴＲＭ ４５１２７和ＴＲＭ ４５１９８间的相似性为 ＴＲＭ ４５３８７、ＴＲＭ ４５１２７和ＴＲＭ ４５１９８以极高的自 ９９％，可能为同一个种的不同菌株；ＴＲＭ ４５１２７和 展值在Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ科内形成稳定的、独立的分 ＴＲＭ ４５１９８与ＴＲＭ ４９１３６的相似性均为９８％，可能 支，根据比对结果和进化距离分析，它们同最近亲缘 为相同种，但是根据菌株的菌落形态（图１ ｅ、ｆ、ｇ）和 关系的Ｇ．ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ ＴＲＭ ４０１３７ 和Ｇ． 显微形态（图２ ｅ、ｆ、ｇ）特征差异，可以初步推断 ａｒｉｚｏｎｅｎｓｉｓ ＮＲＲＬ Ｂ一１６１５３ 的相似性仅为９４． ＴＲＭ ４５１２７和ＴＲＭ ４５１９８与ＴＲＭ ４９１３６为不同种， ０Ｏ％、９４．９３％、９６．５８％、９４．６７％和９４．４ｌ％代表 还需进一步验证。菌株之间的相似性见表４。 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ内的新种。 表４罗布泊Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ菌株间相似性比较 １４ 塔里木大学学报 第２６卷 单元。这些罗布泊地区Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌的独特性 高的研究价值，值得深入研究。 可能是在罗布泊独特的地理位置和高温干旱的气候 环境中长期适应进化而形成的。地理位置和气候环 参考文献 境可能是导致它们差异的根本原因，这些种类是否 存在真正意义上的生物地理分布，尚有待进一步研 究。 ［１］ 袁世斌，周婷，董微，等．罗布泊沙土微生物生态分布 特征［Ｊ］．兰州大学学报（自然科学版），２００９，４５（６）： １９—２２． ［２］ 关统伟．新疆罗布泊盐湖放线菌多样性及多相分类 自抗生素被发现以来，三分之二以上都是由放 线菌产生的。当普通环境发现新活性代谢产物的可 能性逐渐降低时，人们将目光投向了极端特殊环境 和海洋环境。目前，已从土壤 ］、药用植物 Ｊ、海 洋【１叫和海洋沉积物ｌｌ 等环境中分离到Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ 的放线菌。而罗布泊高温干旱、高盐碱的环境蕴藏 着大量Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌的未知新资源，这些新物 种的发现必定将伴随着新的代谢产物及活性物质的 产生。自１９８５年Ｌａｂｅｄａ等人建立Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ以来 的２０多年中，仅Ｌａｂｅｄａ等人（１９８７）报道了来源于 菌株Ｇ．ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ ＡＴＣＣ ４３１５５Ｔ能产生无定形的 氨基酸类物质，具有抗菌和抗肿瘤活性，对革兰氏阴 性菌、阳性菌、小鼠淋巴细胞性白血病Ｐ３８８、人类肺 癌和结肠癌细胞等有抑制作用 ］。近年来，随着研 究技术的不断进步，越来越多具有抗菌活性的 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌被报道。Ａｄｅｌｉｎｅ Ｓｕ Ｙｉｅｎ Ｔｉｎｇ等 人（２００９）从土壤和植物根际土壤中分离到２株 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌，它们对金黄色葡萄球菌，大肠杆 菌和绿脓杆菌都有很好的抑制作用ｌ２ ；袁丽杰等人 （２０１２）从药用植物蒿本的根际土壤中分离到一株 Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ放线菌１０６—０２６５８，其发酵液具有 Ｃａｓｐａｓｅ７抑制活性＿２ 。通常放线菌产生的代谢产 物多数都对革兰氏阳性菌有明显的抑制作用，对革 兰氏阴性菌的抑菌率相对较低，而本研究中ＴＲＭ ４５３８７仅对大肠杆菌表现出较好的抑菌活性。有研 究表明氨基糖苷类、Ｂ一内酰胺类或四环素类抗生 素对革兰氏阴性菌有很好的抑制作用的同时，对革 兰氏阳性菌也有抑菌活性＿２ 。由此看来ＴＲＭ ４５３８７可能具有产生只抑制革兰氏阴性菌的“特异 性”新化合物的能力，而罗布泊来源的Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ 是否具有其它生物活性尚不得而知。因此可以认 为，Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ作为一类较为“年轻”的物种具有较 ［Ｄ］．四川农业大学，２０１２． ［３］Ｓｔａｃｋｅｂｒａｎｄｔ Ｅ，Ｒａｉｎｅｙ Ｆ Ａ，Ｗａｒｄ—Ｒａｉｎｅｙ Ｎ Ｌ．Ｐｒｏ— ｐｏｓａｌ ｆｏｒ ａ ｎｅｗ ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ，Ａｃｔｉ— ｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｃｌａｓｓｉｓ ｎｏｖ．［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９９７， ４７：４７９—４９１． ［４］Ｌａｂｅｄａ Ｄ Ｐ，Ｔｅｓｔａ Ｒ Ｔ，Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ Ｍ Ｐ，ｅｔ ａ１． Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ，ａ Ｎｅｗ Ｇｅｎｕｓ ｏｆ ｔｈｅ Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ［Ｊ］． Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，１９８５，３５：４１７— ４２１． ［５］Ｌａｂｅｄａ Ｄ Ｐ，Ｋｒｏｐｐｅｎｓｔｅｄｔ Ｒ Ｍ．Ｅｍｅｎｄｅｄ ｄｅｓｃｉｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ａｎｄ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ａｌｇｅｒｉｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ．，Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ａｒｉｚｏｎｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ． ａｎｄ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒａｅ ｓｐ．ｎｏｖ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００４，５４（６）：２３４３—２３４６． ［６］ Ｑｉｎ Ｓ，Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ，Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｇ ｏｍｙｃｅｓ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｕｓ ｓｐ．ｎＯＶ．，ａｎ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ ｉｓｏ－ ｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｏｆ Ｃａｒｅｘ ｂａｃｃａｎｓ Ｎｅｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００８，５８（１１）：２５２５—２５２８． ［７］ Ｇｕａｎ Ｔ Ｗ，Ｘｉａ Ｚ Ｆ，Ｘｉａｏ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ ｓｐ．ｎｏｖ．，ａ ｎｏｖｅｌ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｈｙｐｅｒｓａｌｉｎｅ ｈａｂｉｔａｔ ｉｎ Ｘｉｎｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ａｎ－ ｔｏｎｉｅ Ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ，２０１１，１００（１）：１３７—１４３． ［８］ Ｑｉｎ Ｓ，Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ，Ｋｌｅｎｋ Ｈ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｓｃｏｐａｒｉａｅ ｓｐ．ｎｏｖ．ａｎｄ Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｍａｙｔｅｎｉ ｓｐ．ｎｏｖ．，ｉ— ｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００９，５９（５）：１０２３—１０２７． ［９］ Ｇｕ Ｑ，Ｚｈｅｎｇ Ｗ，Ｈｕａｎｇ Ｙ．Ｇｆｙｃｏｍｙｃｅｓ ｓ０ｍ６ｕｃ ｓｐ． ｎｏｖ．，ａｎ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｏｆ Ｓａｍｂｕｃｕｓ ａｄｎ￣ａ Ｗａｌｌ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌ， ２００７，５７（９）：１９９５—１９９８． ［１０］ Ｅｖｔｕｓｈｅｎｋｏ Ｌ Ｉ，Ｔａｐｔｙｋｏｖａ Ｓ Ｄ，Ａｋｉｍｏｖ Ｖ Ｎ，ｅｔ ａ１． ￣ｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｔｅｎｕｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ， １９９１，４１：１５４—１５７． ［１１］鲍士旦．土壤农化分析［Ｍ］．第三版．北京：中国农 第４期 韩晓雪等：罗布泊糖霉菌属放线菌系统进化分析 １５ 业出版社，２０００． ｌｅｃｔｅｄ Ｆｏｏｄｂｏｍｅ Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ［Ｊ］．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０１３，６１（２５）：６０４４ ６０４９． ［１２］ Ｓｈｉｒｌｉｎｇ Ｅ Ｂ，Ｇｏｔｔｌｉｅｂ Ｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９６６， １６：３１３—３４０． ［１９］ Ｂｒｅｄｈｏｌｄｔ Ｈ，Ｇａｌａｔｅｎｋｏ Ｏ Ａ，Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｒａｒｅ ａｃｔｉｎｏｍｙｅｅｔｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｈａｌｌｏｗ ｗａｔｅｒ ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ ［１３］ 关统伟，吴晋元，唐蜀昆，等．新疆塔里木盆地可培养 ｏｆ ｔｈｅ Ｔｒｏｎｄｈｅｉｍ ｆｊｏｒｄ，Ｎｏｒｗａｙ：ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ 嗜盐放线菌系统发育多样性［Ｊ］．微生物学通报， ２００８，３５（１１）：１６９８—１７０２． ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００７，９ （１１）：２７５６—２７６４． ｄｅｒｓ Ｄ Ｂ，Ｌａｂｅｄａ Ｄ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ［２０］ Ｌｅｅ Ｍ Ｄ，Ｂｏｒｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ＬＬ—ＤＱ５１３９ ｂｅｔａ ｆｒｏｍ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ［１４］ Ｃｕｉ Ｘ Ｌ，Ｍａｏ Ｐ Ｈ，Ｚｅｎｇ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｒｅｐｔｉｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｓａｌｉｎａ ｇｅｎ．ｎｏｖ．，ｓｐ．ｎｏｖ．，ａ ｎｅｗｍｅｍｂｅｒ ｏｆｔｈｅｆａｍｉ— ｌｙ Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓａｃｅａｅ［Ｊ］．Ｉｍ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｅｖｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ， ２００１，５１（２）：３５７—３６３． Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓ ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ，ｇｅｎ．ｎｏｖ．，ｓｐ．ｎｏｖ．［Ｐ］． ＵＳ４５６８６４６Ａ． ［１５］ 陈正军．硝尔库勒湖放线菌多样性及聚酮类功能基 因的发掘硝尔库勒湖放线菌多样性及聚酮类功能基 ｎｇ Ａ Ｓ Ｙ，Ｔａｎ Ｓ Ｈ，Ｗａｉ Ｍ Ｋ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈａｒａｃ－ ［２１］ Ｔｉｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｗｉｔｈ Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ 因的发掘［Ｄ］．塔里木大学，２０１２． ［１６］ 徐丽华，李文均，刘志恒．放线菌系统学一一一原理、 方法及实践．第一版．北京：科学出版社，２００７：９８— ９９． Ｆｒｏｍ Ｓｏｉｌ ａｎｄ Ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ Ｓｏｉｌ［Ｊ］．Ａｕｓｔｒｌａｉａｎ Ｊｏｕｍａｌ ｆ ｏＢａｓｉｃ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００９，４（３）：４０５３— ４０５９． ［２２］ 袁丽杰，刘爱华，张玉琴，等．一株根际放线菌的分离 鉴定及其生物活性初探［Ｊ］．生物技术通报，２０１２ （０３）：１１７—１２２． ［１７］ 钱存柔，黄仪秀．微生物学实验教程［Ｍ］．北京大学 出版社，２０００：２０７—２０８． ［１８ ］ Ｄｉａｏ Ｗ Ｒ，Ｈｕ Ｑ Ｐ，Ｆｅｎｇ Ｓ Ｓ，ｅｔ １．Ｃｈｅｍｉａｃａｌ Ｃｏｍｐｏ— ｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｓｓｅｎｔｉｌ Ｏｉａｌ ｆｒｏｍ ［２３］ 张致平．抗革兰氏阴性细菌感染药物的研究现状与 进展［Ｊ］．中国抗生素杂志，２００３，２８（１２）：７０５— ７１１，７３６． Ｇｒｅｅｎ Ｈｕａｊｉａｏ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ ｓｃｈｉｎｉｆｏｌｉｕｍ）ａｇａｉｎｓｔ Ｓｅ一