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透析袋前处理

2023-05-03 来源:钮旅网


透析袋预处理方法 -

(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋

(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min

(3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗

(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min

(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。

重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作

(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

透析和透析袋的处理

保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为\"保留液\",袋(膜)外的溶液称为\"渗出液\"或\"透析液\"。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。

目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写

为MwCO)通常为1 万左右。为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。

可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少量NaN3,以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。洗净晾干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。

新透析袋 如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内 将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。

检查透析效果的方法是:用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等

用过的透析袋保存前需要怎么处理?

用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置50%乙醇中保存即可;用

完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,前两种保存比较好!

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