・４５２・ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏ１．１４。Ｎｏ．６ Ｍａｒ．２０１５ ２０１０，３６３（８）：７３３—７４２． 研究［Ｊ］．实用肿瘤学杂志，２００６，２０（１）：５６—５７． ［７］Ｖａｎ ｄｅｒ Ｂｕｒｇ ＭＥ，Ｖｅｒｇｏｔｅ Ｉ，Ｏｎｓｔｅｎｋ Ｗ，ｅｔ １．Ｌｏｎｇ—ｔａｅｒｍ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ［１３］王兴春．老年非小细胞肺癌患者化疗后细胞免疫功能的变化［Ｊ］． ｗｅｅｋｌｙ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ：ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｗｅｌｌ— 中国老年学杂志，２０１４，１６（７）：１７９６—１７９７． ［１４］钟连花．八珍颗粒配合食管癌术后放化疗的临床疗效观察［ｃ］．福 ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２０１３，４９（１１）：１２５４—１２６３． 州：福建中医药大学，２０１０． ［８］ 郎济禄，孙贤．养正合剂联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床 ［１５］孙卓．八珍颗粒联合化疗治疗晚期乳腺癌３０例临床观察［Ｊ］．中国 效果观察［Ｊ］．实用肿瘤学杂志，２０１２，２６（３）：２５９—２６１． 当代医药，２００９，１６（１１）：１２１—１２２． ［９］Ｓｈｏｎｉ Ｍ，Ｐａｒｒａ—Ｈｅｒｒａｎ ＣＥ，Ｍａｙ Ｔ，ｅｔ １ａ．Ｍｕｌｉｔｐｌｅ ｓｙｎｃｈｒｏｎｏｕｓ ｐｒｉ・ ［１６］黄海红．八珍颗粒治疗贫血５Ｏ例［Ｊ］．中国社区医师（医学专业）， ｍａｒｙ ｇｙｎｅｃｏｌ０ｇｉｃ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ ｉｎ ａｌｌ ＭＳＨ２ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｃａｒｒｉｅｒ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏ－ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｔｅａｔｒｍｅｎｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｌａｔｉｎｕｍ—ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｍｅｔｒｉｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ，２０１３，３１（３）：ｅ３３—３６ ［１Ｏ］雒志明，畅怡，聂秀红．紫杉醇联合卡铂治疗老年非小细胞肺癌毒 性反应及对策的临床分析（附１５５例报告）［Ｊ］．北京医学，２００７， ２９（９）：５３７—５３９． ２０１０，１２（３１）：１３５． ［１７］Ｃｒａｍａｒｏｓｓａ Ｇ，Ｚｅｎｇ Ｌ，Ｚｈａｎｇ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ｏｖｅｒｌａｌ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ ｌｉｆｅ ｉｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｕｓｉｎｇ ＥＯＲＴＣ ＱＬＱ—Ｃ３０ 【Ｊ］．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｅｃｏｎ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ Ｒｅｓ，２０１４，１４（１）：１３９— １４６． ［１１］刘城林，陈为平，崔书中，等．参芪扶正注射液辅助化疗治疗老年 ［１８］Ｎｉｅｋｌａｓｓｏｎ Ｍ，Ｂｅｒｇｍａｎ Ｂ．Ｖａｌｉｄｉｔｙ，ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃｌａ ｅｒｌｅｖａｎｃｅ ｏｆ 非小细胞肺癌临床观察【Ｊ］．中国中西医结合杂志，２００４，２４（１ｏ）： ＥＯＲＴＣ ＱＬＱ—ｃ３０ ａｎｄ ＬＣ１３ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｌｌ ｃｈｅｓｔ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ ｉｎ ａ ９Ｏｌ一９０３． ［１２］Ｔｅｍｅｌ ＪＳ，Ｇｒｅｅｒ ＪＡ，Ｍｕｚｉｋａｎｓｋｙ Ａ，ｅｔ １．Ｅａｒａｌｙ ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ ｃａｒｅ ｆｏｒ ｐａ－ ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ—ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ， ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ ｓｅｔｉｔｎｇ［Ｊ］．Ｑｕａｌ Ｌｉｆｅ Ｒｅｓ，２００７，１６（６）：１０１９—１０２８． （收稿日期：２０１４—１０—１５） ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０１５．０６．００７ 文章编号：１６７１—４６９５（２０１５）０６—０４５２—０３ ＭａｓｓＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ高通量技术 检测胃癌ＬＴＡ单核苷酸多态性及其临床应用 李如凯 郭龙华 （１深圳市宝安区石岩人民医院检验科２深圳市龙华新区人民医院检验科【摘要】 目的广东 深圳５１８１０８； 广东 深圳５１８１０９） 探讨ＬＴＡ基因单核苷酸多态性与胃癌易感性的相关性。方法 选择６０例胃癌患者和６Ｏ例健康 人群为研究对象。采用ＭａｓｓＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ高通量技术检测淋巴毒素一ｏｔ（ＬＴＡ）基因单核苷酸（ＳＮＰ）位点ｒｓ９０９２５３基因 多态性，分析其出现频率及与胃癌易感性的相关性。结果 胃癌组与正常组在ＡＡ基因频率（２０．００％ｖｓ．２１．６７％）差异 无统计学意义；Ｇ等位基因、ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ基因型或变异基因型与胃癌易感风险相关［ＯＲ（９５％ＣＩ）：１．４８（１．１５—１．９９）、 １．３６（１．０５～１．６８、１．３２（１．２２—１．６５）］。结论【关键词】 胃癌ＬＴＡ基因ｒｓ９０９２５３位点单核苷酸多态性与胃癌易感性相关，Ｇ等位基 因、ＧＧ、ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ基因型或变异基因型可能是胃癌发病的危险因素。 ＭａｓｓＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ ＬＴＡ单核苷酸多态性 Ｍａ￣ＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ ｈｉｇｈ—ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ＬＴＡ ｔ￣ｔｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｔｓｍｓ．Ｌ／Ｒｕ—ｋａｉ ，ＧＵＯ 一ｈｕａ ．１ ＤｅｐａｒｔｅｎｔｏｍｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｏ＂ａｎＤｉｓｔｒｉｃｔ ＳｈｉｙａｎＰｅｏｐｌｅ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１８１０８，Ｃｈｉｎａ；２ＤｅｐａｒｔｅｎｔｏｍｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙ， Ｌｏｎｇｈｕａ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１８１０９，Ｃｈｉｎａ． 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ＬＴＡ ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ（ＳＮＰ）ａｎｄ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ— （ＬＴＡ），ＳＮＰ ｌｏｃｉ ｒｓ９０９２５３ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｎｍｒｐｈｉｓｍ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｍａｓｓ ａｒｒａｙ Ａｓｓａｙ ｈｉＳｈ—ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｉｎ ６０ ｃａｓｅｓ ｐａ－ ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ６０ ｃａｓｅｓ ｗｉｈ ｔｈｅａｌｔｈｙ ｐｅｏｐｌｅ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ａｎｄ ｓｕｓｅｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｗａｓ ｎａａｌｙｚｅｄ．Ｒｅ－ ｓｕｉｔｓ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ＡＡ ｇｅｎｅ ｆｅｑｕｅｎｃｙ（２Ｏ．０ｏ％ｖｓ．２１．６７％）ｂｅｔｒｗｅｅｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ．Ｇ ａｌｌｅｌｅ，ＧＡ，ＧＧ ｔｙｐｅ＋ＧＡ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ＯＲ ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉｎｔａｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｉｓｋ ｏｆ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｇａｓｔｉｒｃ ｃａｎｃｅｒ［０Ｒ（９５％ｃｉ）：１．４８ （１．１５—１．９９），１．３６（１．０５～１．６８），１．３２（１．２２～１．６５）］．Ｃｏｎｄｕｓｉｏｎ Ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｅｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ＬＴＡ ｒｓ９０９２５３ ａｎｄ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｇａｓｔｉｃ ｃａｎｃｅｒｒ ａｒｅ ｐｏｓｓｉｂｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ．Ｇ ａｌｌｅｌｅ，ＧＧ，ＧＡ，ＧＧ＋ＧＡ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｏｒ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｍａｙ ｂｅ ａ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓｌ Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ；Ｍａｓｓ ＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ；ＬＴＡ；Ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ 胃癌是临床常见的恶性肿瘤之一，占消化道恶性肿 性（ＳＮＰ）是常见的单碱基突变，为新一代遗传学标记突 瘤的第一位，发病机制尚未完全，可能与幽门螺杆菌感 变方式 Ｊ，常见的研究方法有变性梯度凝胶电泳酶切 染、遗传、环境等因素有关。早期症状并不明显，很大程 法、构象多态性、ＴａｇＭａｎ探针法、限制性片段长度多态 度影响了治疗效果。因此寻找特异性标志物，对于胃癌 性等，但均存在通量低、检测成本高、无法实现自动化等 ２ ３。ＭａｓｓＡＲＲＡＹ采用质谱检测技术进行核酸分 的早期诊断与筛查有极其重要的意义。单核苷酸多态 缺陷［析，融汇了ＰＣＲ技术的高灵敏性以及质谱技术的高精 ２０１２年深圳市科技局课题：利用ＭａｓｓＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ高通量技术检测 确性，具有位点选择灵活、检测结果可靠、检测通量高、 胃癌相关基因单核苷酸多态性及其临床应用（编号：２０１２０３２９５） 临床和实验Ｉ玉学毒志２０１５年３月 第１４卷 第６期 ・４５３・ 检测成本低的优点。本研究采用ＭａｓｓＡＲＲＡＹ Ａｓｓａｙ高 ＞０．０５）；胃癌组与正常组ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ表达频率差异均 通量技术，检测ＬＴＡ基因ｒｓ９２９２５３多态性与胃癌易感 有显著性（Ｐ＜０．５，Ｐ＜Ｏ．００１）。采用多因素回归分析， 对年龄、性别、吸烟史、饮酒史、肿瘤家族史校正后，ＧＡ、 性的关系。 ＧＧ＋ＧＡ基因型或变异基因型ＯＲ（９５％ｃｉ）分别为１．４８ １对象与方法 １．１研究对象选择２０１２年３月至２０１３年３月我院 （１．１５～１．９９）、１．３６（１．０５～１．６８）；Ｇ等位基因与Ａ等位 收治的胃癌患者６０例为胃癌组，均经病理确诊。选择 基因比较，０Ｒ（９５％ＣＩ）为１．３２（１．２２～１．６５）。见表２。同期６０例健康人群为正常组，按照性别与年龄与胃癌 组进行匹配。本次研究方案报经医院伦理委员会批准， 所有受检对象均签署知情同意书。两组纳入对象的性 别构成比、年龄比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；吸烟 表２ ＬＴＡｒｓ９０９２５３等位基因与基因型分布［例（％）］ 基因型 胃癌组（ｎ＝６０）正常组（ｎ＝６０）× 值０Ｒ（９５％￣Ｉ）Ｐ值 史、饮酒史、肿瘤家庭史等资料经检验比较差异有统计 学意义（Ｐ＜０．０５）。见表１。 表１两组患者临床资料对比 资料 胃癌组（ｎ＝６０）正常组（ｎ＝６０）ｔ／）（２值Ｐ值 １．２方法 Ｉ．２．１ ＤＮＡ提取空腹条件下取外周血标本２ ｍｌ，置 于７０℃保存。采用美国ＯＭＥＧＡ公司ＤＮＡ提取试剂盒 提取ＤＮＡ，严格按照试剂盒操作说明书进行，紫外核酸 定量，提取ＤＮＡ稀释至５ ｎｇ／｝ｘｌ保存于一７０％备用。 １．２．２ 引物设计采用Ａｓｓａｙ Ｄｅｓｉｇｅｒ设计软件，对 ＬＴＡ＋２５２位点（ｒｓ９０９２５３）单核苷酸多态性（ＳＮＰ）位点 设计引物和ＰＣＲ扩增，ＰＣＲ引物：５ 一ＡＣＧＴＦＧＧＡＴ． ＧＡＧＡＣＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＧＡＡＧ一３，、５ 一ＡＣＧＴＹＧＧＡＴ— ＧＡＣＴＣＴＣＣＡＴＣＴＣＴＣＡＧＴＣＴＣ一３，；延伸引物：５ 一ＧＡＡＧ— ＧＡＡＣＡＧＡＧＡＧＧＡＡ——３＂０ １．２．３基因分型采用Ｍａｓｓ ＡＲＲＡＹ分子阵列分析系 统，对ＬＴＡ基因（ｒｓ９０９２５３）位点作基因分型。①ＰｃＲ反 应：９４ｏＣ ５ ｍｉｎ；９４℃２０ ｓ，５６ｏＣ ３０ ８，７２ｏｃ １ ｒａｉｎ；７２℃１ ｍｉｎ，４２个循环；７２ｃＩ＝３ ｍｉｎ。②虾碱性磷酸酶（ＳＡＰ）反 应：３７￣Ｃ１ ｍｉｎ，８５￣Ｃ １０ ｍｉｎ，完成后降至４℃保存。③单 碱基延伸反应：９４℃１５ ｍｉｎ；９４ｏＣ ２０ ８，５６℃３０ ｓ，７２ｏＣ １ ａｒｉｎ，７２￣Ｃ ３ ｍｉｎ，完成后４℃保存。④检测分型：采用 Ｍａｓｓ ＡＲＲＡＹ运行程序点样检测，根据等位基因分子质 量差异进行分型。 １．３观察指标观察胃癌组与正常组、胃癌组与正常 组不同性别、年龄在Ｇ、Ａ等位基因、ＧＧ、ＧＡ、ＡＡ、ＧＧ＋ ＧＡ出现频率。 １．４统计学分析 所有计数资料均用频数（Ｉ＇１）或率 （％）表示，经Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡检验，采用ＳＰＳＳ １４．０软件进行卡方检验，多因素分析采用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回 归。检验标准：Ｐ＜０．０５。 ２结果 ２．１ ＬＴＡｒｓ９０９２５３位点基因多态性与胃癌易感性分析 胃癌组与正常组在ＡＡ基因频率差异无统计学意义（Ｐ 注：“一”为一个相对比较值。 ２．２不同性别ＬＴＡｒｓ９０９２５３位点基因多态性与胃癌易 感性分析男性与女性胃癌组与正常组基因类型比较 差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）。见表３。 表３不同性别中ＬＴＡｒｓ９０９２５３基因类型与胃癌易感性的关系【例（％）］ ２．３不同年龄ＬＴＡｒｓ９０９２５３位点基因多态性与胃癌易 感性分析以５０岁作为一个临界点，＞１５０岁与＜５０岁 胃癌组与正常组基因类型频率比较差异无显著性（Ｐ＞ ０．０５）。见表４。 表４不同年龄ＬＴＡｒｓ９０９２５３基因类型与胃癌易感性的关系 ［例（％）］ ３讨论 胃癌是胃肠黏膜发生的恶性肿瘤，是我国最常见的 消化道路恶性肿瘤，患病率和病死率居各种类消化道恶 性肿瘤的首位Ｌ３ Ｊ。ＭａｓｓＡＲＲＡＹ分子量阵列技术是Ｓｅｇ— ｕｅｎｏｍ公司推出的最先进的基因分析工具，通过将简 单、可靠的引物延伸反应与ＭＡＬＤＩ—ＴＯＦ—ＭＳ技术结 合，达到基因分型检测的目的，具有高通量、高灵敏度、 高准确度的优势 Ｊ。 ＬＴＡ基因位于ＨＬＡ—Ｂ与ＨＬＡ—Ｃ之间，也称淋巴 毒素 ，因体内淋巴细胞受到有丝分裂原或抗原刺激活 化后而分泌的一种细胞炎性因子 Ｊ，属于肿瘤坏死因子 家族成员，其第一内含因子＋２５２位点ｒｓ９０９２５３多态性 直接影响到ＬＴＡ基因的转录水平 Ｊ。国内外研究结果 表明，ＬＡＴ＋２５２等位基因（Ａ—Ｇ）突变可能影响到血浆 ・４５４。 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．６ Ｍａｒ．２０１５ 中或体外ＴＮＦ—ｐ的表达，进而诱发肿瘤坏死因子 感性相关，Ｇ等位基因、ＧＧ、ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ基因型或变异 （ ｒＮＦ—ｏｔ）、干扰素（ＩＦＮ一＾ｙ）、白细胞介素１（ＩＬ一１）、白 基因型可能是胃癌发病的危险因素。 细胞介素６（ＩＥ一６）、白细胞介素８（ＩＬ一８）等致炎性细 参考文献 胞因子的产生，促进胃癌的发生与发展［ 。Ｇｅｎ等 有 ［１］关去哲．ＪＷＡ基因＋７２３Ｇ／Ｔ基因型单核苷酸多卷ｆ生对表浅性膀胱癌患 关１３本人群的研究表明，ＬＴＡ＋２５２位点处Ｇ等位基因 者预后的影响［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１２，１６（９）：１７１０—１７１２． ［２］Ｄｉｎｇ ＧＧ，Ｚｈａｎｇ ＧＬ，Ｃｈｅｔｒ ＸＣ，ｃｔ ａ１．Ａ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅ— ｔｗｅｅｎ ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｅｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ｉｎｔｅｄｅｕｋｉｎ一２２ ａｎｄ ｓｕｓｃｅｐｔｉ— 以及ＧＧ基因型人群发生胃癌的几率风险远高于其它 位点和其它基因类型，而Ｄｅａｎｓ等 在有关英国人群的 研究中报道，ｍ＋２５２位点基因Ｇ／Ａ多态性与发生胃 癌风险关联性不大，提示对于不同的人群ＬＴＡ＋２５２单 核苷酸多态性与胃部发生相关性不尽相同。 ｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ］．ＺｈｏｎｇｈＨａ Ｊｉｅ Ｈｅ Ｈｅ Ｘｉ Ｚａ Ｚｈｉ， ２０１２，３５（８）：５９６—６００． ［３］刘金龙，邬淑雁，刘丽红，等．外周血生存素的表达与胃癌生物学 行为相关性研究［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１２，１６（１）：５７—５９． ［４］ Ｓａｉｅｇ ＭＡ，Ｇｅｄｄｉｅ ＷＲ，Ｂｏｅｍｅｒ ＳＬ，ｅｔ ａ１．ＥＺＨ２ ａｎｄ ＣＤ７９Ｂ ｍｕｔａｔｉｏｎ— ａｌ ｓｔａｔｕｓ ｏｖｅｒｔｉｍｅｉｎＢ——ｃｅｌｌ ｎｏｎ—－Ｈｏｄｇｋｉｎｌｙｍｐｈｏｍａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ 本研究以我院收治的６０例胃癌患者和健康患者为 研究对象，通过分析ＬＴＡ＋２５２位点基因分布频率，在等 位基因Ｇ、Ａ比较上，表现出明显的相关性ＯＲ（９５％ＣＩ） ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｕｓｉｎｇ ｍｉｎｉｍａｌ ｓａｍｐｌｅｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｌ， ２０１３，１２１（７０）：３７７—３８６． —［５］ Ｇａｒｅｉａ—Ｇｏｎｚａｌｅｚ ＭＡ，Ｎｃｏｌａｓ—Ｐｅｒｅｚ Ｄ，Ｌａｎａｓ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｒｏｌｅ ｏｆ ｈｏｓｔ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｎ ａ Ｃａｕｃａｓｉａｎ ｃｏｈｏ￣ 为１．３４（１．０ｌ一１．７３），与何选秋等 的研究结果基本 致。在基因类型ＡＡ分布频率上，胃癌组与正常组在 ＡＡ基因频率（２０．００％ｖｓ．２１．６７％）差异无统计学意义， 一ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｉｒｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１２，７（９）： ｅ４６１７９． ［６］Ｓｕｚｕｋｉ Ｇ，Ｃｕｌｌｉｎｇｓ Ｈ，Ｆｕｊｉｗａｒａ Ｓ，ｅｔ ａ１．ｍ ２５２ＧＧ ａｎｄ ＧＡ Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ａＩｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｄｉｆｕｓｅ—Ｔｙｐｅ Ｎｏｎｃａｒｄｉａ Ｇａｓｔｒｉｃ ＣＩｔｎｏ￣ｒ斑ｓｋ ｉｎ ｔｈｅ 提示ＡＡ基因类型与胃癌易感性没有相关性。与傅冷 西等 关于ＴＮＦ—Ｂ＋２５２ Ａ等位基因和ＩＬ一１０启动 子一１０８２Ａ等位基因可能是胃癌发生的易感基因的研 究报道不一致，可能与研究对象的选择、检测方法有关。 进一步研究发现，在校正年龄、吸烟史、饮酒史、肿瘤家 族史等因素后，ＧＧ、ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ基因类型与胃癌诱发 风险呈正相关性，与国内外文献报道基本一致¨ 。 本研究结果还发现，尽管胃癌的易感性与Ｇ等位基 Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ，２００９，１４９（６）：５７１—５７９． ［７］Ｌｕ Ｒ，Ｄｏｕ ｘ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｏｆｌｙｍｐｈｏｔｏｘ・ ｉｎ—ａｌｐｈａ（Ｌ ＩＩＡ）ｇｃｎｅ ｍ９０９２５３ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｒｉｓｋ ｉｎ ａｎ Ａｓｉａｎ ｐｏｐｕｅ３８０—６１ａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ，２０１２，３６（６）：ｅ３８０ 一ｅ３８６． ［８］Ｓｕｚｕｋｉ Ｇ，Ｃｕｌｌｉｎｇｓ Ｈ，Ｆｕｊｉｗａｒａ Ｓ，ｅｔ ａ１．加１Ａ ２５２ＧＧ ａｎｄ ＧＡ Ｇｅｎｏ－ ｔｙｐｅｓ ａｒｅ Ａｓｓｃｉａｔｏｅｄ ｗｉｈ Ｄｉｔｆｆｕｓｅ—Ｔｙｐｅ Ｎｏｎｃａｒｄｉａ Ｇａｓｔｉｃｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｉｓｋ ｉｎ ｔｈｅ Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ，２００９，１４（６）：５７１－５７９． ［９］Ｄｅａｎｓ ＤＡ，Ｔａｎ ＢＨ，Ｒｏｓｓ ＪＡ，ｅｔ ａ１．Ｃａｎｃｅｒ ｃａｃｈｅｘｉａ ｉｓ ｓｓａｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｈｅ ＩＬｌ０—ｔ－１０８２ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇａｓ￣ｏｅ－－ 因、ＧＧ、ＧＡ、ＧＧ＋ＧＡ等基因类型有关，但与受检人群的 年龄、性别没有相关性。这一研究结果有助于我们调整 胃癌早期诊断思路，同时，由于胃癌易感性与 ＬＴＡｒｓ９０９２５３位点单核苷酸多态性作用机制不十分明确， 加上本文采用的是病例对照研究，且样本数量较小，所得 结果需要进一步的大样本的前瞻性研究来予以证实。 ４结论 ｓｐｈａｇｅａｅｌ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ，２００９，８９（４）：１１６４—１１７２． ［１０］何选秋，李粉霞，杨学习．ＬＴＡ基因单核苷酸多态位点与胃癌易感 性的研究［Ｊ］．分子诊断与治疗杂志，２０１１，３（４）：２４１—２４４． ［１１］傅冷西，彭孝纬，何利平，等．ＣＩＭ Ｔ细胞及其相关前炎症细胞因 子基因多态性与胃癌发生的关系［Ｊ］．中国综合临床，２００８，２４（３）： ２Ｏ４—２ｏ７． ［１２］Ｍａｈａｊａｎ Ｒ，Ｅ１一Ｏｍａｒ ＥＭ，Ｌｉｓｓｏｗｓｋａ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｉｒａｎｔｓ ｉｎ Ｔｈｅｌｐｅｒ ｃｅｌｌ ｔｙｐｅｌ，２ ａｎｄ ３ ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｇａｓｔｉｃ ｃａｎｃｅｒｒ ｒｉｓｋ ｉｎ ａ ｐｏｌｉｓｈ ｐｏｐｕｌａｔｏｎ［Ｊ］．Ｊｐｎ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ，２００８，３８（９）：６２６—６３３． （收稿日期：２０１４—１１—２５） ＬＴＡ基因ｒｓ９０９２５３位点单核苷酸多态性与胃癌易 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—４６９５．２０１５．０６．００８ 文章编号：１６７１－４６９５（２０１５）０６—０４５４—０４ 维生素Ｄ在类风湿关节炎患者中的 水平变化及其与疾病发展的相关性研究 郭洪佩 范俊 徐瑛 任方 （上海同济大学附属杨浦医院１风湿科；２检验科上海２０００９０） 选择门 【摘要】 目的探讨维生素Ｄ在类风湿关节炎（ＲＡ）患者中的水平变化及其与疾病发展的相关性。方法诊收治的ＲＡ患者共５７例和健康对照４０例，检测并收集所有研究对象血清２５（ＯＨ）Ｄ水平，ＲＡ患者的类风湿因子 （ＲＦ）、抗环瓜氨酸肽（ＣＣＰ）抗体、疾病活动评分（ＤＡＳ２８）、红细胞沉降率（ＥＳＲ）、Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）、血清免疫球蛋白 ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ等，并比较分析。结果ＲＡ患者血清２５（ＯＨ）Ｄ水平（１４．９１±３．７６ ｎｇ／ｍ１）显著低于健康对照组（２５．８７± 课题项目：上海市卫生局支持项目，编号：２０１３４３３７