中国康复理论与实践２０１５年８月第２１卷第８期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｒｅｈａｂｉｌ Ｔｈｅｏｒｙ Ｐｒａｃｔ，Ａｕｇ．，２０１５，Ｖ０Ｊ．２ｌ，Ｎｏ．８ ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００６－９７７１．２０１５．０８．００６ ・基础研究・ 电针曲池、足三里穴对缺血再灌注损伤大鼠线粒体Ｃａｓｐａｓｅ一３途径 诱导细胞凋亡的影响 上官豪 ，柳维林 ，陈文列 ，郑薏 ，王鲜 ，林云娇 ，王露露 ，陈立典 ，陶静 【摘要ｌ 目的观察电针曲池、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周围区皮质神经细胞超微结构和ｃａｓｐａｓｅ．３、Ｂｃ１．２、Ｂａｘ ３６只雄性Ｓｐｒａｇｕｅ．Ｄａｗｌｅｙ大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组，每组ｌ２只。采用Ｌｏｎｇａ线栓法制作 电针治疗后，电针组大鼠神经行为学评分较 蛋白表达的影响。方法左侧大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。电针偏瘫侧曲池、足三里穴３０ ｍｉｎ。治疗前后分别进行神经行为学评分，采用透射电镜观 察神经细胞超微结构，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测ｃａｓｐａｓｅ．３、Ｂｃ１．２及Ｂａｘ的表达。结果ｏ．ｏ１），ｃａｓｐａｓｅ．３、Ｂａｘ蛋白表达低于模型组（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论神经细胞凋亡。 【关键词ｌ脑缺血再灌注；电针；线粒体；ｃａｓｐａｓｅ．３；凋亡；大鼠 模型组降低（Ｐ＜０．０５）；电镜下电针组较模型组核染色质均匀，线粒体数量增加；电针组Ｂｃ１．２蛋白表达水平明显高于模型组（尸ｌ＜ 电针曲池、足三里穴可通过线粒体．ｃａｓｐａｓｅ．３途径抑制缺血周围区皮质 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ Ｑｕｃｈｉ（ＬＩｌ１）ａｎｄ Ｚｕｓａｎｌｉ（ＳＴ３６）ｏｎ Ｎｅｕｒｏｎａｌ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ Ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｍｉｔｏｃｈｏｎ－ ｄｒｉａ－ｃａｓｐａｓｅ－３ Ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ Ｒａｔｓ ｗｉｔｈ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ ＳＨＡＮＧＧＵＡＮＨａｏ１．ｕＵ Ｗｅｉ—ｌ 。ＣＨＥＮ Ｗｅｎ—ｌｉｅ２，ＺＨＥＮＧ Ｙｉｌ．ＷＡＮＧＸｉａｎｔ ＬＩＮ Ｙｕｎ－ｊｉａｏｌ ＷＡＮＧ Ｌｕ．１ｕｔ．ＣＨＥＮ Ｌｉ—ｄｉａｆｆ，ＴＡＯＪｉｎｇ＇ １．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｊｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ ３５０１２２， Ｃｈｉｎａ；２．Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｊｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｙ ｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ ３５０１２２， Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｆｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ（ＥＡ）ａｔ Ｑｕｃｈｉ（ＬＩ１ １）ａｎｄ Ｚｕｓａｎｌｉ（ＳＴ３６）ａｃｕｐｏｉｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｕｌｔｒａ－ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ａｒｅａ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ－３，Ｂｃｌ－２，Ｂａｘ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈ－ ｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６ ｍａｌｅ ａｄｕｌｔ Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒｎｄｏｍｌａｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈａｍ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ １２ ｒａｔｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｗｉｈ ｔｌｅｆｔ ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅ－ ｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ（ＭＣＡＯ）ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｈｅｔ ｍｏｄｉｉｆｅｄ Ｌｏｎｇａ＇ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｒｏｕｐ ｇｒｅｃｅｉｖｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ Ｑｕ— ｃｈｉ（ＬＩＩ １）ａｎｄ Ｚｕｓａｎｌｉ（ＳＴ３６）ｏｎ ｔｈｅ ｐａｒａｌｙｚｅｄ ｌｉｍｂ，ｆｏｒ ３０ ｍｉｎｕｔｅ．Ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｓｃｏｒｅｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｂｅｆｏｒｅ ｎｄ ａａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ． ｈｅ Ｔｕｌｒｔａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｈ ｔｒｔｎｓａｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（ＴＥＭ）．Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｓ— ｐａｓｅ・３，Ｂｃｌ一２ ａｎｄ Ｂａｘ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｓｃｏｒｅ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｒｏｕｐ ｇｈａｔｎ ｉｎ ｈｅ ｔｃｏｎｔｒｏｌ ｒｏｕｐ（ｇＰ＜０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｈ ｔｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｒｏｕｐ，ｔｇｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｏｆ ｎｅｒｏｎｓｕ ｗａｓ ｅｖｅｎ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ・２ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ－３ ａｎｄ Ｂａｘ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｅｅｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ ｔｈａｎ ｉｎ ｈｅｔ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｔｍｃｔｕｒｅ ａｔ Ｑｕｃｈｉ（ＬＩ１ １）ａｎｄ Ｚｕｓａｎｌｉ（ＳＴ３６）ａｃｕｐｏｉｎｔｓ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｎｅｕ－ ｒｏｎｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｒｅａ ａｔｈｒｏｕｇｈ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｃａｓｐａｓｅ一３ ｐａｔｈｗａｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ；ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ；ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ；ｃａｓｐａｓｅ一３；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｒａｔｓ ｌ中图分类号】Ｒ７４３．３【文献标识码ｌ Ａ【文章编号ｌ １００６．９７７１（２０１５）０８—０９００－０５ Ｉ本文著录格式ｌ上官豪，柳维林，陈文列，等．电针曲池、足三里穴对缺血再灌注损伤大鼠线粒体Ｃａｓｐａｓｅ．３途径诱导细胞凋 亡的影响［Ｊ】．中国康复理论与实践，２０１５，２１（８）：９００．９０４． ＣＩＴＥＤ ＡＳ：Ｓｈａｎｇｇｕａｎ Ｈ，Ｌｉｕ ＷＬ，Ｃｈｅｎ ＷＬ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ Ｑｕｃｈｉ（ＬＩ１ １）ａｎｄ Ｚｕｓａｎｌｉ（ＳＴ３６）ｏｎ ｎｅｕｒｏｎａｌ 基金项目：国家自然科学基金项目（Ｎｏ．８１２７３８３５；Ｎｏ．８１３７３７７８）。 作者单位：１．福建中医药大学康复医学院，福建福州市３５０１２２；２．福建中医药大学中西医结合研究院，福建福州市３５０１２２。作者简介：上官 豪（１９９０．），男，汉族，福建清流县人，硕士研究生，主要研究方向：脑血管病的临床与康复。通讯作者：１￣（１９７７一），女，汉族，江苏淮安市 人，医学博士，副教授，硕士研究生导师，主要研究方向：脑血管病的临床与康复。Ｅ－ｍａｉｌ：ｔａｏｊｉｎｇ０１＠１６３．ｃｏｍ。 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｊｒｔｐｏｎｌｉｎｅ．ｃｏｍ 中国康复理论与实践２０１５年８月第２１卷第８期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｒｅｈａｂｉｌ Ｔｈｅｏｒｙ Ｐｒａｃｔ，Ａｕｇ．，２０１５，Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．８ ——９０１—— ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｃａｓｐａｓｅ－３ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ Ｋａｎｇｆｕ Ｌｉｌｕｎ Ｙｕ Ｓｈｉ— ｊｉａｎ，２０１５，２１（８）：９００－９０４． 缺血性脑卒中是临床的常见病、多发病，具有高 死亡率、高致残率、高复发率等特点［１１。缺血性脑卒 中涉及复杂的病理生理变化，呈现一个时间、空间改 变的动态过程，与细胞凋亡关系密切。目前研究已经 化物酶二抗（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ，ＵＳＡ）、１０％ 水合氯醛、３％戊二醛．１。５％多聚甲醛、１％锇酸．１．５％ 亚铁氰化钾。 １．３制备左侧ＭＣＡＯ模型 术前大鼠禁食，大鼠经１０％水合氯醛３ ｍｌ／ｋｇ腹腔 注射麻醉，仰卧固定大鼠，颈部皮肤消毒备皮后，沿 前正中线切开颈部皮肤，充分暴露左侧颈总动脉、颈 内动脉、颈外动脉，用结扎线依次结扎颈总动脉近心 端、颈外动脉远心端，用显微血管夹夹闭颈内动脉， 在距颈总动脉分叉处约１．０ ｃｍ处用显微剪刀剪一切 口，将直径为０．２ ｍｍ的鱼线从切口处缓慢进人颈内 动脉，松开血管夹，当鱼线头端到达大脑中动脉起始 表明，细胞凋亡与线粒体功能密切相关，而线粒体是 细胞凋亡调控中心。线粒体膜电位消失，通透性改 变，释放细胞色素Ｃ（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ，Ｃｙｔ ｃ），激活ｃａｓ— ｐａｓｅ一９／ｃａｓｐａｓｅ一３等分子诱导细胞凋亡［２．。Ｂｃｌ。２蛋白家 族中，抗凋亡蛋白Ｂｃｌ一２阻碍Ｃｙｔ Ｃ的释放，抑制凋 亡；而另一部分如Ｂａｘ等促进凋亡。Ｂｃ１．２与Ｂａｘ相互 作用共同参与程序性细胞凋亡过程口 】。Ｂｃ１．２家族基 因与Ｃａｓｐａｓｅ家族共同参与了细胞凋亡中由线粒体介 导的内源性途径。抗凋亡Ｂｃ１．２家族成员下调或促凋 亡成员在线粒体膜上过度表达和移位，导致线粒体通 透性增加，激活ｃａｓｐａｓｅ家族，导致细胞凋亡 。ｃａｓ— ｐａｓｅ．３是多种凋亡途径最主要的下游效应因子之一， 是细胞凋亡的关键酶。在脑缺血后程序性细胞死亡过 程中，激活的ｃａｓｐａｓｅ一３通过对ＤＮＡ修复蛋白、细胞 端处（从颈外动脉与颈内动脉分叉处起计算插人约１ ８～ ２２ ｍｍ）ｌ￣［Ｊ可。固定线栓，缝合切口。手术结束后，动 物放置于室温环境下苏醒。２ ｈ后缓慢退出鱼线至分 叉处。试验过程和动物苏醒期间注意保温。动物苏醒 后观察其体态及行为，以判断ＭＣＡＯ模型是否成功。 手术后大鼠正常喂食，饮水。 假手术组只分离左侧颈总、颈内、颈外动脉，不 予以插线栓。 １．４电针干预 骨架蛋白及其他ｃａｓｐａｓｅ相关底物蛋白产生裂解的作 用，直接参与细胞凋亡的发生，导致脑缺血再灌注损 伤。进一步研究发现，在缺血性神经损伤过程中，抑 制ｃａｓｐａｓｅ一３活性可产生明显的神经保护作用 。我们 前期研究发现电针曲池和足三里３ ｄ能激活ＰＩ３ｋ／Ａｋｔ 信号通路，抑制细胞凋亡来发挥对脑缺血再灌注损伤 的神经保护功能 １。本研究拟进一步观察电针曲池、 足三里穴是否通过线粒体．ｃａｓｐａｓｅ．３途径治疗脑缺血 再灌注损伤，发挥神经保护作用。 １材料与方法 １．１实验动物及分组 雄性Ｓｐｒａｇｕｅ．Ｄａｗｌｅｙ大鼠３６只，体质量２００—２５０ 电针组大鼠在造模后２ ｈ开始进行电针干预。根 据《实验针灸学》 取大鼠右侧曲池、足三里穴。局 部消毒后，用０．５寸毫针（华佗牌３０号），直刺２～３ ｍｍ，接电针仪（Ｇ６８０５型），电压峰值为６ ｖ，疏密 波，频率１－２０ Ｈｚ，以大鼠肢体轻微抖动为度，治疗 时间为３０ｍｉｎＲ￣，１次／ｄ，疗程ｌ ｄ。假手术组及模型 组大鼠同一时间以同样方法固定３０ ｍｉｎ，但不予电针 刺激。 １．５神经行为学评分 所有大鼠在缺血再灌注后２ ｈ及２４ ｈ后，进行两 次Ｌｏｎｇａ神经功能缺损评分。神经行为学评估方法： ｇ，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可 证号：ＳＣＸＫ（沪２０１２．０００２）。动物饲养于ＳＰＦ级动物 实验室，模拟标准日夜系统，予以自由饮食及饮水。 将大鼠进行编号，采用随机数字表法将其分为假 手术组、模型组及电针组，每组ｌ２只。模型组与电针 组采用Ｌｏｎｇａ嘲法制备左侧大脑中动脉梗死（ｍｉｄｄｌｅ ｃｅ． ｒｅｂｒａｌ ａｎｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，ＭＣＡＯ）模型，２ ｈ后进行神经行 为学评分隋１。 １．２主要试剂 无神经功能缺损，０分；提尾时右前肢内收，不能完 全伸展，１分；自发行走时向右侧转圈，２分；行走时 身体向右侧倾倒，３分；不能自发行走，有意识丧 失，４分。０分及４分者予以剔除。 该评估均由一名对本研究不知情的观察者完成。 １．６透射电镜观察 各组大鼠分别于电针干预１ ｄ后，用１０％水合氯 醛３ ｍｌ／ｋｇ腹腔麻醉成功后，用４％多聚甲醛经心脏灌 Ｂｃｌ一２、Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ一３、Ｂ—ａｃｔｉｎ一抗及辣根过氧 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｊｒｔｐｏｎｌｉｎｅ．ｃｏｍ 中国康复理论与实践２０１５年８月第２１卷第８期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｒｅｈａｂｉｌ Ｔｈｅｏｒｙ Ｐｒａｃｔ，Ａｕｇ．，２０１５，Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．８ ［３】Ｓｉｄｄｉｑｕｉ ＷＡ，Ａｈａｄ Ａ，Ａｈｓａｎ Ｈ．Ｔｈｅ ｍｙｓｔｅｒｙ ｏｆ ＢＣＬ２ ｆａｍｉｌｙ： ｎｉｚｅｓ ｄｏｐａｍｉｎｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｂｅｈａｖｉｏｒｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ａｎ ＡＫＴ／ｇｌｙ－ Ｂｃｌ－２ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ａｎ ｕｐｄａｔｅ［Ｊ】．Ａｒｃｈ Ｔｏｘｉｃｏｌ， ２０１５，８９（３）：２８９－３１７． ｃｏｇｅｎ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｋｉｎａｓｅ ３ ｓｉｎａｌｇｉｎｇ ｃａｓｃａｄｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ，２００４，１０１（１４）：５０９９．５１０４． ［４】Ｒｅｎａｕｌｔ ＴＴ，Ｆｌｏｒｏｓ Ｋ、‘Ｅｌｋｈｏｌｉ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｓｈａｐｅ ｇｏｖｅｒｎｓ ＢＡＸ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏ－ ［１ ７】Ｙａｎｇ Ｌｉ Ｘ，Ｚｈａｎｇ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ． ｌａｍｍａｔｉｆｏｎ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ＰＰＡＲ￣／ＨＯ一１ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｉｎ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｓｉｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ，２０１５，５７（１）：６９－８２． ［５】Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｘｉｎｇ Ｄ，Ｃｈｅｎ Ｍ．Ｂｉｍ（Ｌ）ｄｉｓｐｌａｃｉｎｇ Ｂｃｌ－ｘ（Ｌ）ｐｒｏ－ ｍｏｔｅｓ Ｂａｘ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ＴＮＦ ａｌｐｈａ－－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏ・・ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ，２０１５，８（３）：２４８４－２４９４． ［１ ８】Ｄａｎｇ Ｓ，Ｌｉｕ Ｘ，Ｆｕ ｅｔ ａ１．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ｌｏｃａｌ ｉｎｔｒａ－ａｒｔｅ． ｒｉａｌ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｏｆ ｅｒｙｔｒｏｐｏｉｈｅｔｉｎ ａｆｔｅｒ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｓｉｓ［Ｊ］．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，２００８，１３（７）：９５０—９５８． ［６】Ｃｈｅｌｌｕｂｏｉｎａ Ｂ，Ｋｌｏｐｆｅｎｓｔｅｉｎ ＪＤ，Ｏｕｊｒａｔｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｔｅｍｐｏｒａｌ ｒｅｇ－ ｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉ－ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ａｆｔｅｒ ｍｉｄｄｌｅ ｒａｔｓ［Ｊ】．Ｎｅｕｒｏｌ Ｒｅｓ，２０１１，３３（５）：５２０—５２８． ［１９】Ｃｈｕｄｏｂａ Ｋａｍｉｉｆｓｋａ Ｄ，Ｋｏ￣ｃｉｅｌｓｋａ－Ｋａｓｐｒｚａｋ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｄｕｒａ． ｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｄｅａｔｈ ａｎｄ ｃｏｌｄ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｔｉｍｅ，ｂｕｔ ｎｏｔ ｗａｒｌＴｌ ｉｓｃｈ． ｅｍｉａ ｔｉｍｅ，ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ印叩－ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｎｅｕ－ ｒｏｂｉｏｌ，２０１４，４９（１）：５０—６５． ［７】Ｘｕｅ Ｘ，Ｙｏｕ Ｔａｏ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｅｌｅｃｔｒｏ—ａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ ｐｏｉｎｔｓ ｏｆ Ｚｕ． ｓｎｌａｉ ｎｄ ａＱｕｃｈｉ ｅｘｅｒｔｓ ｎｔａｉ・ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｍｏｄｕｌａ－ ｔｉｏｎ ｏｆ ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ】．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｌｅｔｔ，２０ １４， ５５８：１４．１９． ｔｏｓｉｓ ｉｎ ｔｒｎｓａｐｌａｎｔｅｄ ｋｉｄｎｅｙｓ ｆｒｏｍ ｄｅｃｅａｓｅｄ ｄｏｎｏｒｓ［Ｊ］．Ｔｒｎｓａ－ ｐｌｎｔａ Ｐｒｏｃ，２０１１，４３（８）：２８８７－２８９０． ［２０】Ｋｕｍａｒｓｗａｍｙ Ｒ，Ｓｅｔｈ ＲＫ，Ｄｗａｒａｋａｎａｔｈ ＢＳ，ｅｔ ａ１．Ｍｉｔｏｃｈｏｎ． ｄｒｉａｌ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｓｅｃｔ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｐｅｒｍｅａｂｉｌ－ ［８ Ｌｏｎｇａ ＥＺ，Ｗｅｉ８］ｎｓｔｅｉｎ ＰＲ，Ｃａｒｌｓｏｎ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ ｗｉｔｈｏｕｔ ｃｒａｎｉｅｃｔｏｍｙ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ】． Ｓｔｒｏｋｅ，１９８９，２０（１）：８４－９１． ｉｙ ｔｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｐｏｒｅ—ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ－ｃ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｌｅｐ－ ｉｄｏｐｔｅｒｎ Ｓｆａ９ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，２００９，４１（６）： １４３０．１４４０． ［９李忠仁．实验针灸学【９】Ｍ】．北京：中国中医药出版社，２００７：２４２． ［１０】Ｚｈａｎｇ ＧＣ，Ｆｕ ＷＢ，Ｘｕ ＮＧ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｔａ ｎａｌａｙｓｉｓ ｏｆｔｈｅ ｃｕｒａ－ ｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｏｎ ｐｏｓｔ・ｓｔｒｏｋｅ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ】．Ｊ Ｔｒａ－ ｄｉｔ Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ，２０１２，３２（１）：６－１１． ［２１］Ｋａｗａｉ Ｃ，Ｐｅｓｓｏｔｏ ＦＳ，Ｒｏｄｒｉｕｅｓｇ Ｌ ｅｔ ａ１．ｐＨ—ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ ｃ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｎｅｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ．Ｉｍｐｌｉｃａ— ｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９，４８（３５）：８３３５—８３４２． ［１１】Ｃｈｏ ＳＹ，Ｋｉｍ Ｍ，Ｓｕｎ ＪＪ，ｅｔ ａ１．Ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｂｒａｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｅｔｗｅｅｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｓｕｂｊｅｃｔｓ ａｎｄ ｓｔｒｏｋｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｎ ｆＭＲＩ ｂｙ ａｃｕ－ ｐｕｎｃｔｕｒｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｉｎｔｅｇｒ Ｍｅｄ，２０１３，ｌ９（４）： ２６９．２７６． ［２２］Ｍｏｒａｌｅｓ—Ｃｒｕｚ Ｍ，Ｆｉｇｕｅｒｏａ ＣＭ，ＧｏｎｚＭｅｚ－Ｒｏｂｌｅｓ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ａｃ． ｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ・－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｂｙ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉｖ．－ ｃｒｙ ｏｆ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ ｃ－ｂａｓｅｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ［Ｊ】．Ｊ Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ－ ｏｇｙ，２０１４，１２：３３． ［１２】罗玲，王静，任玉兰，等．古代针灸治疗中风穴位处方配伍规律 研究［Ｊ］．成都中医药大学学报，２０１０，（４）：１－４． ［２３］Ｘｕｅ Ｘ，Ｙｕ儿，Ｓｕｎ ＤＱ，ｅｔ ａ１．Ｃｕｒｃｕｍｉｎ ｉｎｄｕｃｅｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ＳＧＣ－７９０１ ｇａｓｔｒｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｔｏ－ 【１３】孙英霞，张悦．中风偏瘫采用体针治疗方法集粹［Ｊ］．中医药 学刊，２００１，１９（１）：３５． ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｓｉｎａｌｇｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．Ａｓｉｎ Ｐａｃａ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｅｙ， ２０１４，１５（９）：３９８７－３９９２． ［１４】王哗，刘乃红，王锐，等．大鼠全脑缺血再灌注后海马ＣＡ１区 神经元凋亡机制的研究【Ｊ】．中西医结合心脑血管病杂志， ２０１１，９（７）：８４８・８５０． 【２４】Ｋｕｌｉｋｏｖ ＡＶ，Ｓｈｉｌｏｖ ＥＳ，Ｍｕｆａｚａｌｏｖ ＩＡ，ｅｔ ａ１．Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ ｃ： ｔｈｅ Ａｃｈｉｌｌｅｓ’ｈｅｅｌ ｉｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ，２０１２，６９ （１１）：１７８７—１７９７． ［１５】Ｆａｎｇ Ｌ，Ｏａｏ Ｈ，Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａ１．Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ａｌｌｅｖｉａｔｅｓ ｎｅｒｖｅ ［２５］游咏梅，薛偕华，陶静，等．电针曲池穴及足三里穴对脑缺血再 灌注损伤大鼠神经细胞线粒体凋亡途径的影响［Ｊ】．中华物理 医学与康复杂志，２０１４，３６（１０）：７４５．７５０． （收稿日期：２０１５．０７．０７ 修回日期：２０１５．０７．２２） ｉｎｊｕｒｙ ａｆｔｅｒ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ａｎｄ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｉｎｈｉｂ・ ｉｔｉｎｇ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｎｄ ａａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｍｅｄ，２０１５， ８（３）：３２ １ ９－３２２６． ［１６】Ｂｅａｕｌｉｅｕ ＪＭ，Ｓｏｔｎｉｋｏｖａ ＴＤ，Ｙａｏ ＷＤ，ｅｔ ａ１．Ｌｉｔｈｉｕｍ ａｎｔａｇｏ－ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｊｒｔｐｏｎｌｉｎｅ．ｃｏｒｎ