TTF-1和Calretinin在肺腺癌胸水中的表达及意义

·1711·

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TTF-1和Calretinin在肺腺癌胸水中的表达及意义

高福平,魏摇谨,马摇平,薛摇松摇(江苏省南京市高淳人民医院病理科,江苏摇南京摇211300)

[摘摇要]摇目的:探讨TTF-1和Calretinin在肺腺癌患者胸水中的诊断价值。方法:利用免疫组化EnVision二步法检测43例肺腺癌患者胸水和45例良性疾病胸水中TTF-1和Calretinin的表达情况。结果:TTF-1在肺腺癌胸水中的阳性表达率为95郾35%(41/43),在肺良性疾病胸水中未见阳性表达(0/45),两者TTF-1表达差异有显著统计学意义(P<0郾01)。Calretinin在肺腺癌胸水中的阳性表达率为13郾95%(6/43),在肺良性疾病胸水中阳性表达率为82郾22(37/45),Calretinin在两者中的表达差异有显著统计学意义(P<0郾01)。结论:TTF-1和Calretinin可应用于肺腺癌患者胸水中癌细胞的诊断及鉴别诊断。

[关键词]摇肺肿瘤;腺癌;甲状腺转录因子1;钙视网膜蛋白;免疫组织化学

ExpressionandsignificanceofTTF-1andCalretinininpleuralfluidofpatientswithlungadenocarci鄄noma摇摇GAOFu-ping,WEIJin,MAPing,etal(DepartmentofPathology,GaochunPeople忆sHospital,Nanjing211300,Chi鄄

na)

Abstract:ObjectiveTotoinvestigatethediagnosticvalueofTTF-1andCalretinininpleuraleffusionofpatientswithlungadenocarcinoma郾MethodTheexpressionofTTF-1andCalretinininpleuraleffusionof43patientswithlungadenocarcinomaand45patientswithbenigndiseaseswasdetectedbyimmunohistochemicalEnVisiontwo-stepmethod郾ResultsThepositiveex鄄lungdiseases(0/45)郾TherewassignificantdifferenceintheexpressionofTTF-1betweenthetwogroups(P<0郾01)郾Theposi鄄tiveexpressionrateofCalretininwas13郾95%(6/43)inpleuraleffusionoflungadenocarcinomaand82郾22%(37/45)inpleu鄄pressionrateofTTF-1inpleuraleffusionoflungadenocarcinomawas95郾35%(41/43),butnotinpleuraleffusionofbenign

raleffusionofbenignlungdiseases郾TherewassignificantdifferenceintheexpressionofCalretininbetweenthetwogroups(P0郾01)郾ConclusionTTF-landCalretininareclinicallyvaluablefordiagnosinganddifferentiallydiagnosingthecancercellsin

KeyWords:Lungneoplasms;Adenocarcinoma;Thyroidtranscriptionfactor1;Calretinin;Immunohistochemistry

放入每支100ml的塑料离心管中,3000r/min,离心10min,弃上清,向离心管中加75%乙醇5ml,3000r/min,再次离心10min,静置后弃上清液,加4%甲醛,固定2h后取出沉淀物,进行脱水,制成细胞石蜡块。

1郾2郾2摇免疫组化操作:所有标本均用4%甲醛固定,常规石蜡包埋,4滋m切片,行EnVision二步法免疫组化染色。TTF-1(克隆号8G7G3/1)和Calretinin(克隆号SP13)均为即用型,购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1郾3摇结果判断:TTF-1表达于细胞核。肿瘤细胞无表达或<1%细胞表达判断为(-),肿瘤细胞阳性表达逸1%时为(+)。Caretinin阳性部位细胞核/浆,以细胞核/浆内出现棕褐色颗粒为阳性细胞,随机计数5个高倍视野,首先按染色强度评分:无色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。再按阳性细胞所占的百分比评分:阴性为0分,阳性细胞臆10%为1分,11%~50%为2分,51%~75%为3分,>75%为4分。染色强度计分与阳性细胞百分比的乘积大于3分为免

摇摇肺癌严重威胁人类的生存和健康,在我国,肺癌是死亡的首要因素[1]。肺腺癌是肺癌最常见类型,晚期常常伴有恶性胸腔积液。恶性胸腔积液的确诊有赖于胸水细胞学检查,但有时由于癌细胞数量较少,异型不明显等原因确诊较为困难,而且经常需要与良性间皮增生相鉴别。本文采用胸水细胞块检测TTF-1和Calretinin的表达情况,探讨肺腺癌和肺良性疾病胸水的表达差异,旨在寻找一种更为敏感精确的检测方法。1摇资料与方法

1郾1摇一般资料:收集南京市高淳人民医院2012年1月~2016年6月间住院患者88例,未行任何治疗前采集的胸腔积液。其中男56例,女32例,年龄22~87岁,平均65郾3岁,原发性肺腺癌43例,肺结核45例。所有病例均行肺纤维支气管镜或肺穿刺活检病理证实。1郾2摇方法

1郾2郾1摇细胞块的制作:做常规细胞学涂片后,残余液体全部

·1712·疫反应阳性。

1郾4摇统计学处理:所有资料均为计数资料,均在统计软件SPSS17郾0上进行字2检验,P<0郾05为差异有统计学意义。2摇结果

摇摇TTF-1在肺腺癌胸水中的阳性表达率为95郾35%,在肺良性疾病胸水中未见阳性表达,两者TTF-1表达差异有显著统计学意义(P<0郾01)。Calretinin在肺腺癌胸水中的阳性表达率为13郾95%,在肺良性疾病胸水中阳性表达率为82郾22,Cal鄄retinin在两者中的表达差异有显著统计学意义(P<0郾01)。见表1。

吉林医学2019年8月第40卷第8期

中枢和外周神经以及间皮细胞可见表达。Calretinin可用于胸膜腔积液的鉴别诊断。李香菊等研究显示,calretinin对间皮细胞的敏感性为90郾9%,特异性为87郾2%[7]。张继贤等研究证实,Calretinin在恶性间皮瘤中的表达率明显高于Calretinin在肺腺癌中的表达[8]。邬万新等研究发现Calretinin检测间皮细胞的敏感性100%,特异性为94郾7%[9]。本组研究发现Calretinin在肺腺癌胸水中的阳性表达率为13郾95%(6/43),在肺良性疾病胸水中阳性表达率为82郾22(37/45),Calretinin在两者中的表达差异有显著统计学意义(P<0郾01),与文献报道一致。

摇摇TTF-1和Calretinin两种抗体的联合应用构成一组互补表1摇P63和Calretinin在肺腺癌和肺良性疾病胸水细胞块组织中的表达疾病类型例数TTF-1+摇-字2值

P值

Calretinin+摇-字2

值

P值

肺腺癌胸水

43

41280郾340郾00063741郾010郾000

肺良性疾病胸水45

0

45

37

8

3摇讨论

摇常常应用的诊断技术摇胸水细胞学检查具有操作简单。但是,临床常常遇到高度怀疑肺癌患,损失较小的特点,是临床者,反复多次的细胞学检查却无法诊断的情况。鉴别胸水中的癌细胞和反应性的间皮细胞,是诊断的关键。近年来,免疫组化在病理诊断中的作用显著,有望辅助肺癌患者的胸水诊断[2]摇Factor摇。

TTF-自神经内胚层及外胚层的细胞中阳性表达1,TTF-1),1全称为甲状腺转录因子是NKX2转录基因家族中的一员1(ThyroidTranscription[3],主要在源量为38KDa,在人体主要选择性表达于甲状腺滤泡上皮。TTF-1的分子、甲状腺滤泡旁C细胞、肺细支气管上皮、域型肺泡细胞等部位。目前已经有多个研究发现TTF-1在肺腺癌中呈高表达。徐晓艳等研究发现,TTF-1在肺腺癌活检标本中的阳性表达率为92郾腺癌诊断中的敏感度为6%,敏感性和特异性强[4]85郾1%。方强等研究发现(63/74),特异,TTF-1度为98郾在肺6%(68TTF-1/69)[5]。由于甲状腺癌导致胸水的情况临床罕见,因此积液的研究中是现今可用于检测肺癌胸水的理想标记物[2],印剑等发现肺腺癌转移性心包积液TTF-1。在心包的阳性率为75郾0%(24/32)[6]胸水中的阳性表达率为95郾35%。本组研究发现(41/43),在肺良性疾病胸水TTF-1在肺腺癌中未见阳性表达(0/45),两者TTF-1表达差异有显著统计学意义(P<0郾01),证实TTF-1是肺腺癌胸水标记的可靠肿瘤指标,可应用于临床肺腺癌胸水的检测。

摇摇Calretinin是一类相对分子量为29000的钙结合蛋白,在

单克隆抗体组,可以从正反两个方面联合筛查肺癌患者胸水中的癌细胞,能进一步提高诊断的敏感性和特异性,对诊断胸水中的腺癌具有十分重要的应用价值,可在临床中进一步推

广开展。4摇参考文献

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