第一周实习报告

实习报告

来到康已经一个多星期的时间了，在这段时间里，我主要和郑XX一组，进行液相色谱的相关学习。我们做的实验主要有：测茶浓缩液中的caffeine；辣椒精中的苏丹红；茶萃取液中的氨基酸以及黑加仑饮料中的花青素。另外我还和陈学姐一起学习了使用酶标仪对鸡肉中的氯霉素进行检测。

在测茶浓缩液中的caffeine这个实验中，对所用流动相的配制以及样品的前处理都有了一定的了解。液相的流动相主要分为两路，水相和有机相，在这个实验中，我们所用的是1%的乙酸-水，和1%的乙酸-乙腈。我们配制500ml流动相，将5ml乙酸分别加入到495ml的超纯水以及ACN中，再分别加入0.02gEDTA（乙二胺四乙酸），对其进行稳定。对标准品主要做2，5，10，20，50ppm，样品03，30，45三种，并且对三种样品做了添加，即03+1，30+1，45+1。用4.6150mm的柱子，通过液相色谱的分析，我们得到结果为：03号样品48.28ug/ml，30号样品36.58ug/ml，45号样品31.12ug/ml。

在测辣椒精中的苏丹红这个实验中，我们使用的流动相相对较为简单，为纯水和纯ACN。我们的样品为油溶辣椒酱，其中有些色素以及大分子物质可能会影响液相结果，因此我们送到相关单位进行凝胶色谱，将这些色素与大分子物质净化掉再进行液相实验。但是送回的样品被稀释了4倍，大约为12.5ppm和50ppm，因此用液相很难检测到其数值。液相的检测范围应大于50ppm，而使用液质其范围应大于10ppm，可以将其检测出来。

在测茶萃取液中的氨基酸这个实验中，我们用到的流动相是PH=7.8的磷酸氢二钠（用NAOH调PH），以及甲醇：ACN：水=45：45：10。标品主要做了2，5，10，20，50ppm五个标准点。做出标准曲线后，通过数据处理得出氨基酸的含量报告。

在测黑加仑饮料中的花青素这个实验中，我们的使用的流动相为水：甲醇：异丙醇：甲酸=73：13：6：8。这个实验的原理主要是前花青素单体或聚合物在加热的酸性条件和铁盐催化作用下，C-C键断裂而生成深红色花青素离子即氰定原理。因此，我们需要配制酸性溶液，即正丁醇：盐酸=95：5，以及硫酸铁铵溶液，来创造酸性条件和铁盐催化的条件，在沸水浴回流装置中加热40min，最终溶液颜色为深红色。在通过液相色谱进行数据处理。

在本周的最后一天，我和陈XX一起对鸡胸，鸡腿以及鸡翅根中的氯霉素进行了检测。公司刚刚购进一台酶标仪，即多功能读数仪。我们只要按照步骤对样品进行前处理以后，仪器就可以很快的读出数据，大大提高了实验的速度。这里主要用到试剂盒。其原理是试剂盒提供的微孔板上的微孔预包被了氯霉素抗体。标准品中的氯霉素即抗原和样品中的抗原分别与酶标记结合物（酶标记抗原）同时竞争包被抗体上的有限结合位点，孵育1h使其充分竞争后，洗去游离的反应物。再加入底物，室温下，酶标记结合物上的辣根过氧化物酶催化底物发生显色反应，孵育一定时间是颜色最大变化。加入终止液终止反应，颜色由蓝转黄。颜色深度与标准品/样品中的氯霉素含量成反比。（酶标记物与抗体结合越多，标准品/样品抗原与抗体结合越少）使用酶标仪在450nm波长下读取相应的吸光度值。使用六个不同浓度的标准品，构建标准曲线，计算样品中氯霉素浓度。

通过以上这些实验，我接触到了许多在学校以及其他工作岗位没有接触过的仪器，在学校的学习中，我只是对一些仪器有过很初步的了解，比如学校的液相色谱是最初级的配置，手动进行样品的添加，而这里的Agilent1100HPLC，是

一种高效液相色谱，其效能远远高于学校的仪器。主要由：储液瓶，脱气机，二元泵，进样器，柱温箱，检测器组成，最后通过电脑程序对数据进行处理。在这些实验中，我还学习使用了涡旋仪，沸水浴回流装置，超纯水系统，冷冻高速离心机，磁力加热搅拌器，均质仪等等。对于液相色谱的原理也有了一定的了解，当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。根据出峰是形状与时间可以检测出混合物中的各组分。

通过这一周的实习，提高了我处理实务的能力，并比较系统的学习了专业知识，这才是我实习的真正收获。在接下来的实习时间里，我将会更加认真的向各位师兄师姐学习，了解实验原理的基础上，参与实验的进行。尽快摆脱身上的学生气，跟上各位同事的步伐，为今后的工作打好基础。在这里，感谢康能够给我这次学习的机会，我会用我出色的工作表现来回报公司对我的培养。