穿刺液标本的细菌学检验SOP微-005

汉源县人民医院检验科 穿刺液标本的细菌学检验操作

编号：LAB/SOP/HY/微-005

日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订 第1页，共2页

一、【标本采集】

各种穿刺液标本，原则上应该请临床医师以无菌穿刺术抽取心包液和关节液1-1.5ml，胸腔积液和腹腔积液抽取量约5-10ml。标本抽取后，以无菌操作方法将其注入无菌试管立即送检，如怀疑厌氧菌感染，应做床旁接种。

二、【检验方法】1.涂片检查

（1）一般细菌涂片检查：将标本经3000r/min，离心30min，弃去上清液，取脓样或非脓样沉渣涂成均匀的薄膜。若穿刺液呈红色，应加等量无菌蒸馏水破坏红细胞后再离心沉淀，取沉渣涂片，革兰染色镜检。可根据所检细菌形态学和染色情况，做出初步报告：“找到革兰×性×菌，形似××菌”。

（2）结核杆菌涂片检查，做抗酸染色。2.细菌培养

（1）一般细菌培养：脓性标本可直接划线接种血平板上，置35℃培养18-24h观察结果，如为非脓性标本，由于含菌少，应先接种肉汤培养基进行增菌后，再移种血平板进行分离培养。若有细菌生长时，应仔细观察，挑选可疑菌落，并作涂片，行革兰染色镜检，得出初步印象，然后再根据其特点进一步鉴定，若符合某细菌的鉴定依据各点则可发出报告：“有××菌生长”，若培养48h仍无细菌生长时，则可报告：“经48h培养无细菌生长”。

（2）结核杆菌培养：离心取沉淀物接种罗氏培养基，35℃下培养3-4W，观察有无细菌生长。

（3）厌氧菌培养：床旁接种或从厌氧菌运送培养基转种后，立即置厌氧环境中35℃培养24-48h，挑取可疑菌落做耐氧试验，确定为厌氧菌，按厌氧菌鉴定程序进行。三、【检验程序】

穿刺也

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需氧培养 直接涂片 厌氧培养—————————— ↓ ↓ ↓ ↓ 革兰、抗酸染色 厌氧血平板、血平板、巧克力平板 35℃18-24h ↓ 厌氧肉汤中国蓝或麦康凯平板 肉汤增菌 镜检 ↓ ↓ ↓ 35℃48h35℃24h ↓ ↓纯培养、鉴定药敏试验→ 报告结果 ← 作者：肖德慧 时间：2010-5-3