免疫学检验试题

章 免疫学检验试题 一、选择题 1. SPA 能特异性与下述哪种 Ig 的 Fc 段结合？ ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD 2. 在人类血清的 Ig 中，κ 链和 λ 链之比 D.肾小球肾炎 8. 关于旁路途径正确的叙述是： ( ) A. 需要抗原抗体的识别和反应 B.膜攻击单位与经典途径相同 C.首先被活化的补体成分是 C5 D.需要经典途径的识别单位和活化单位的参与 9. 能引起恶液质的细胞因子是： ( ) A.TNF- α 为？ ( ) A.1:1 B.1:2 C.1:3 D.2:1 3. 56℃ 30 分钟可使下列哪种 I g 丧失生物学活性？ ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgE 4. 胎血中出现抗风疹病毒的何种 Ig，则表示子宫内感染？ ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD 5. 补体系统的激活必须有下列哪种成分参与？( ) A.C2 B.B 因子 C.C1q D.C3 6. 补体不具备的作用是？ ( ) A.中和作用 B.促进中和及溶解病毒 C.调理作用 D.溶菌作用 7. 补体含量增高见于下列哪种疾病？ ( ) A. 肿瘤 B.系统性红斑狼疮 C.血清病 ···

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B.TGF- β C.IFN- α D.IL-2 10. 下列英文缩写的中文含义错误的是： ( ) A.IL ——白细胞介素 B.EPO ——血小板生成素 C.SCF ——干细胞生长因子 D.TNF ——肿瘤坏死因子 11. 关于 MHC Ⅰ类分子，下列哪项是正确的？ ( ) A. 存在于一切有核细胞上 B. 只存在于白细胞上 C. 只存在于淋巴细胞上 D. 只存在于巨噬细胞上 12. 下列哪种疾病与 HLA-B27 抗原相关性显著：( ) A. 系统性红斑狼疮 B. 类风湿性关节炎 C. 重症肌无力 D. 强直性脊柱炎 13. 无血缘关系的同种器官移植中， 急性排斥反应难以避免的主要原因是： ( ) A.HLA 系统的高度多态性 B.受者的免疫功能常处于紊乱状态 C.移植物供血不良 D. 受者体内已存在对移植物致敏的淋巴细胞 14. 粘附分子包括下列哪项？ ( ) A. 粘合素家族 B. 免疫球蛋白家族 C.选择素家族 D. 以上全都是 15. 绵羊红细胞受体又称为： ( ) A.CD2 B.CD3 C.CD4 D.CD8 16. 关于免疫细胞错误的叙述是： ( ) A.B 淋巴细胞分化为浆细胞 B.NK 细胞引起 ADCC 效应 C.单核吞噬细胞具有抗原递呈功能 D.NK 细胞具有产生抗体的作用 17. 具有特异性杀伤作用的细胞是：( ) A.B 细胞 B. 中性粒细胞 C.NK 细胞 D.CTL 细胞 18. 能够与人类免疫缺陷病毒特异性结合的 CD 分子是： ( ) ···

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A.CD2 B.CD4 C.CD8 D.CD21 19. 与绵羊红细胞特异性结合， 形成玫瑰花环状结构的免疫细胞是： ( ) A.T 细胞 B.B 细胞 C.单核巨噬细胞 D.中性粒细胞 20. B 细胞不具有的功能是： ( ) A. 抗原递呈功能 B.分化为浆细胞产生抗体 C.免疫记忆功能 D.直接杀伤靶细胞 21. 关于 NK 细胞正确的是： ( ) A. 已发现具有特异性抗原识别受体B.具有 MHC 分子的限制性 C.是 ADCC 效应的重要介导细胞D.分泌与 TH2 相同的细胞因子 22. 下列哪项不属于巨噬细胞？ ( ) A. 肝枯否细胞 B.神经组织的小胶质细胞C.肺泡巨噬细胞 D.血液中性粒细胞 23. 下列哪种细胞不具有抗原递呈作用？( ) A.巨噬细胞B.上皮细胞C.神经胶质细胞 D.T 细胞 24. 决定抗原特异性的是： ( ) A ．抗原的物理形状B．抗原结构的复杂性 C．抗原分子表面的特殊化学基团D．抗原分子量的大小 25．与移植排斥反应有关的抗原物质是： ( ) A ． ABO 血型抗原 B． Rh 血型抗原 C． HLA 抗原系统 D．异嗜性抗原 26．关于佐剂的描述， 下列哪项是错误的？ ( ) A.佐剂是特异性的免疫增强剂 B.与免疫源混合后可以增加抗原在体内的存留时间 C.最常用于实验动物的是佛氏佐剂 D.可刺激巨噬细胞， 增加它对抗原的处理和递呈能力 27．下列关于超抗原的性质，哪一项是正确的？ ···

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( ) A ．有严格的 MHC 限制性 B ．无须经 APC 的加工就可以与 MHC-II 类分子结合 C ．与自身免疫无关 D ．内源性超抗原存在于所有哺乳动物体内 28 ．关于抗原，下列哪项组合是错误的？ ( ) A ．半抗原 -青霉素 B ．自身抗原 -HLA C ．完全抗原 -绵羊红细胞 D ．细胞浆抗原 -线粒体抗原 29 ．在初次应答中产生的抗体主要是： ( ) A ． IgM B ． IgG C ． IgA D ． IgE 30 ．在再次应答中产生的抗体主要是： ( ) A.IgM B.IgG C.IgA D.IgE 31 ．体液免疫的效应包括： ( ) A ．调理作用 B ．补体介导的细胞溶解作用 C ． ADCC 作用 D ．以上全是 32 ． B 细胞的抗原识别受体是： ( ) A ． MHC-I 类分子 B ． SmIg C ． CD4 分子 D ． CD8 分子 33．下列哪种免疫作用在无抗体存在的时候仍可发生？ ( ) A ． ADCC 效应 B ．免疫调理作用C．免疫黏附作用 D ．补体经典途径激活 34 ．关于细胞免疫，下列哪项是错误的？ ( ) A ． T 细胞介导，巨噬细胞参与 B ．致敏 Tc 细胞介导的细胞毒作用 C．由 TD 抗原引起 D ．抗原 -肽-MHC 复合物传递活化的第二信号 35 ．细胞间相互作用不受 MHC 限制的是： ( ) A ． Th 与 B 细胞 B ． NK 与靶细胞 C ． Tc 与靶细胞 D ． Th 与巨噬细胞 ···

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46. IL － 2R 主要存在于（ ） 36．哪种免疫现象不是由 T 细胞介导的主要 细胞免疫现象？ ( ) A ．肥大细胞表面 BA ．迟发型超敏反应 ．静止 T 细胞表面 CB．免疫调理作 ．中性粒细胞表面 D用C．抗肿瘤作 ．活化的 T 细胞表面 用 47. 与强直性脊柱炎密切相关的 HLA 分子是（D．同种移植排斥反应 ） A.HLA － 5 37. 提出单克隆选择学说的是（ ） B.HLA － B7 A.Burnet C.HLA － B8 B.Metchnikoff D.HLA － B27 C.Jerne 48. 下列哪项具有 MHC 限制性（ ） D.Watson A ． Tc 杀伤靶细胞 38. 可引起新生儿溶血症的抗体是（ ） B ． ADCC CA. 天然的血型抗体 IgM ． M φ 吞噬抗原 B.天然的血型抗体 IgG D ．补体溶菌 49. C.免疫的血型抗体 IgM 一般说，与抗原递呈有关的分子是（ ） D.免疫的血型抗体 IgG A ． MHC －Ⅱ类分子 B 39. 主要在粘膜局部抗感染的 Ig 是（ ） ． CD1 分子 CA.IgG ． MHC －Ⅰ类分子 D B.IgE ． MHC －Ⅲ类分子 50. MHC 是指（ ） C.IgA A ．染色体上编码组织相容性抗原的一组D.SIgA 紧密连锁的基因群 40. 关于 ADCC 的叙述，下列哪项是正确的 （ ） B ．染色体上编码次要组织相容性抗原的A.IgM 可介导 ADCC 一组紧密联系的基因群 B.M φ 不具有 ADCC C．染色体上编码移植抗原的一组紧密连锁C.CTL 可通过 ADCC 杀伤靶细胞 的基因群 D.ADCC 的杀伤作用是非特异性的 D ．染色体上编码主要组织相容性抗原的41. 多数补体灭活温度及时间是（ ） 一组紧密连锁的基因群 A ． 56℃ 30 分 51.B． 4℃ 2 小时 同时表达 CD3 和 CD4 抗原的细胞有（ ） A ． Tc 细C．－ 30℃ 30 分 胞 B ． Ts D．室温 30 分 细胞 42. 经典激活途径中的 C3 转化酶是（ ） CA ． C B ． C C ． C D ． C 43. 参与攻 ． B 淋巴细胞 D 膜复合体的有关成分是（ ） ． Th 细胞 52.A ． C B ． C3 转化酶 能通过 ADCC 作用杀伤肿瘤细胞的是 （ ） A C． C3b ． CTL 细胞 B D． C5～ C9 ． NK 细胞 44. 补体活化的 MBL 途径的激活物质是 （ ） C ．中性粒细胞 D ． B 细胞 A ．抗原抗体复合物 53.抗原抗体反应的第一阶段一般需要 （ ）时B．凝集的 IgA 间 C．炎症期产生的蛋白与病原体结合 D． IgG1 ～ 3 A. 几分钟至几十分钟 45. 产生 IL － 2 的细胞是（ ） B. 几十分钟至数小时 A ． M φ C. 几秒钟至几分钟 B． T 细胞 D. 数小时至数十小时 C． B 细胞 54.以免疫复合物 /补体为介导的组织炎症为特 D． NK ···

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征的过敏反应属哪一种类型（ ） A. Ⅰ型 B. Ⅱ型 C.Ⅲ型 D. Ⅳ 55.下列哪一个 CD 标志物不是 T 细 型 胞的表面标志物（ ） 上的不完全抗体；间接 Coomb ’ 在 s 试验主要检测 中游离的不完全抗 体。 11． ELISA 间接法的反应原理是利用酶标记 以 检 测 已 与 固 相 结 的 合 。 的 12． ELISA 的洗涤目的是洗去反应液中没有 A.CD3 B. CD19 C.CD16 D. CD8 56.下列哪一个试验不属于沉淀反应（ ） B. 双向免疫扩散C. 与固相 A. 免疫比浊法 法 或 结合的物质以及反 单 向 免 疫 扩 散 D.Coomb ’ s 试 应过程中 法 吸附于固相载体的干扰物 验 质。 57.间接凝集反应的灵敏度要比直接凝集反应 13．TR-FIA 一般是用镧元素 螯合 物作为荧光标记 高（ ）倍 物。 A. 1-2 C. 8-10 14 ． RIA 的 基 本 原 理 是 倍 B. 2-8 倍 抗 原 D.10-100 倍 倍 和 抗 原 对 有 限 量 抗 体 竞 争 58.下列抗体中那一种不属于自身抗体 （ ） 性 或竞争性 反应。 A. 抗 核 抗 体 (ANA) B. 类 风 湿 因 15 ． I 型 超 敏 反 应 主 要 检 测 血 清 C. 抗 D 和 D. 抗 中 子 ，为临床提供实验 室诊断资SS-B(La) 59.下列哪一种 CD 标志可作 料。 为 NK 细胞的表面标志物（ ） A.CD8 B.CD16 C.CD19 7． GVHR 是指移植物中的 淋巴 D. CD2 60.成人血清中 AFP 极微，其 细胞识别 抗原而发生的一种排斥反 含量一般小于（ ） 应。 8． AFP 主要用于高危人群中诊A.<10ug/L B. <20ug/L C. <25ug/L D. 断 肿 <200ug/L 二 .填空题 : 瘤和 肿瘤。 1．异嗜性抗原是一类与 无关的，存在于人、9．沉淀反应分两个阶段：第一阶段发生抗原 动物、植物、微生物中的共同抗原。 结合，第二阶段将形成可2．抗原抗体反应的可逆性特点是指抗原抗体 抗体 见 的结合仅是分子表面的结合， 属 结合， 这 种 结 合 具 有 相 对 ， 但 为 反应。 3．抗原抗体反应一般在 PH 条件下进 行。 4．自身免疫反应如果达到一定强度以致能破 坏 并引起相应 时，则称 为自身免疫病。 5 ． 抗 DNA 抗 体 有 3 类 ， 即 抗 ds-DNA 、 和 。 6．T 细胞表面 的 分子是 HIV 的天 然受体。 ···

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二．论述题 1 ．比较补体两条主要激活途径的不同点。 2 ．补体的生物学活性是什么？ 3 ．细胞因子的生物学作用特点是什么？ 4 ．试论 MHC 在医学上的意义。 5．参与体液免疫应答的细胞有哪些？如何发挥作用？ 6.什么是自身抗原？它是怎样产生的？有何临床意义？ 7. 试述抗原抗体反应的基本原理。 8. 简述 HVGR 和 GVHR 的主要区别。 9.T 细胞亚群检测有何临床意义？ 11. 试述直接 Coomb ’s 试验与间接 Coomb’ s 试验的共同点与不同点。 12. 简述 ELISA 双抗体夹心法的操作步骤。 13.ELISA 操作的注意事项有哪些？ 14.试述流式细胞术（ FCM ）的工作原理及其特点。 10. 简述 ELISA 的基本原理。 的 。 10 ．直接 Coomb ’ s ···

试验主要检测已吸附···

第七章 免疫学检验参考答案 一.选择题 1A ； 2D ； 3D ； 4C； 5D ； 6A ； 7A ； 8B ； 9A ； 10B； 11A； 12D； 13A； 14D； 15A ；16D ；17D； 18B； 19A ； 20D； 21C； 22D ；23D ； 24C；25C；26A ；27B ；28B ；29A ；30B； 31D； 32B ；33B ； 34D；35B ；36B ； 37A ；38D ； 39D ； 40D ； 41A ； ； 49C； 42B ；43D ； 44C；45B ；46D ；47D； 48A 50D ； 51D； 52B ；53C； 54C； 55B ； 56D 57B； 58C； 59B； 60B； 二.填空题 1、种属特异性 2、非共价键、稳定性、可逆 3、 6～ 8 4、正常组织、临床症状 5、抗 ss-DNA 、抗 Z-DNA 6、 CD4 7、抗原特异性、宿主 8、原发性肝脏、胚胎细胞 9、特异性、免疫复合物 10、红细胞、血清 11、抗抗体、受检抗体 12、抗原、抗体、非特异性 13、铕（ Eu） 14、标记、未标记、结合、抑制 15、 IgE、抗特异性过敏原抗体 三.论述题 1.答案： 表 1 两条激活途径的主要不同点 比较项目经典激活途径旁路激活途径 激活物质抗原抗体复合物 LPS、酵母多糖凝聚的 IgG、 IgA 等激活的起点 C1qC3 参与成分 C1 ～ C9C3、 B 、D 、 P 因子， C5～ C9 C3 转化酶 C C C5 转化酶 C C 作用在特异性体液免疫的效应阶段发挥作用参与非特异性免疫，在感染早期即发挥作用 2.答案：补体的生物学活性是指补体活化过程的产物表现出的具有扩大免疫效应的多项生物学活性，根据这些产物的活性特点可分为五类。 (1) 细胞溶解作用即膜攻击作用 新生的 C5b 可插入就近的细胞膜上，进而有 C6、 C7、 和 C9 与膜上有 C5b 组成膜攻击单位 C5b?6?7?8?9n，构成可让细胞膜内外物质自由出入的通道壁，造成细胞或细菌的破裂死亡。 (2调理作用 与病原体或免疫复合物共价键结合C3b，还可与吞噬细胞表面的 ) 的 C3b 受体（ CR1）结合，以促进其吞噬过程，成为补体的调理作用。 (3引起炎症反应（的物质） ， C3a、 C4a、 C5a 有过敏毒素作用， ) 引起炎症反应 C5a 有对粒细胞趋化作用，其综合作用效果是导致组织充血、水肿及渗出等炎症表现。 (4) 清除免疫复合物即补体（ C3b）的免疫粘连作用在替代活化途径和经典活化途径 新产生的 C3b，都可以借其不稳定的硫酯键断裂，直接与病原体（或其成分）或免疫复合物中 的抗原成分共价性结合。和病原体或免疫复合物共价结合的 C3b，可再与血小板或人红细胞表面的 C3b 受体（ CR1）结合，使这些病原体或免疫复合物粘附于血小板或人的红细胞上，成为 ···

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免疫粘连作用。免疫粘连作用不仅可减少血液中游离的免疫复合物及病原体，而且被粘附于血小板或红细胞表面的免疫复合物或病原体易被吞噬细胞捕捉吞噬，消除它们对机体的危害。 (5) 免疫调节作用 补体可对免疫应答的各个环节发挥调节作用：① C3 可参与捕捉、 固定抗原，使抗原被 APC 处理与提呈；②补体成分可与多种免疫细胞相互作用，调节细胞的增 殖分化， 例如 C3b 与 B 细胞表面 CR1 结合，可使 B 细胞增殖 分化为浆细胞。 CR2 能结合 C3d， iC3b 及 C3dg，助 B 细胞活化；③补体参与调节多种免疫细胞效应功能，如杀伤细胞结合 C3b 后可增强对靶细胞的 ADCC 作用。 3.答案： (1) 细胞因子的作用有高效性 极微量（ pg 水平）即可发挥生物学效应。 (2) 细胞因子的旁泌和自泌作用 自产生分泌出来后作用于附近的细胞或自身产生细胞。 (3) 细胞因子作用的一时性 只在局部短时间发挥作用，临床上细胞因子作为药物治疗时，在药理剂量下也可随血流分部全身发挥作用。 (4) 细胞因子作用的多效性 一种细胞因子可作用于多种靶细胞，发挥多种生物学效应 如促进靶细胞增殖分化，增强抗感染和杀伤效应，促进或抑制其他细胞因子的产生和细胞膜表面分子的表达。 (5) 细胞因子作用的网络性 不同的细胞因子之间有相互协同或相互制约的作用，由此构成了复 杂的细胞因子免疫调节网络，如 IL － 1 又到产生 IL － 2， IL － 10 抑制 γ干扰素产生。 4.答案： （1）器官移植：移植排斥反应的实质是免疫应答，故移植成败的关键是供受者间 MHC 的相容 程度。 （2）免疫调节：①抗原提呈： 无论外源性抗原还是内源性抗原大多需经细胞加工处理后形成抗原肽段，再与 HLA Ⅰ、Ⅱ类分子结合， HLA －抗原肽复合物共同表达于细胞膜表面，才能被 CD8＋ T 细胞或 CD4 ＋T 细胞所识别；② MHC 限制性：在免疫应答过程中各种免疫细胞如 Th、 M φ、 B 及 Tc 细胞间的相互作用均受到不同的 MHC 分子的调控或严格的约束。例如， Tc 细胞 识别病毒抗原或肿瘤抗原时必须识别自身 MHC －Ⅰ类分子；而 Th 细胞识别的抗原肽必须是与 自身 MHC －Ⅱ类分子结合者。 这种特定 T 细胞识别特定类别自身 MHC 分子而发挥效应的现象 称 MHC 限制性；③决定免疫应答能力：在 HLA －Ⅱ类基因区有一免疫应答基因 Ir ，可对免疫 应答进行调节，包括增进免疫应答或抑制免疫应答。 （3） HLA 与疾病的关系：人类 MHC 即 HLA 复合体是目前已知的最复杂多态性的人类基因系 统，在人类证实强直性脊柱炎与B27 有强相关性后，通过群体的流行病学调查和家系调查发现 许多内分泌疾病、类风湿性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤和感染性疾病等与 HLA 有关。 HLA 与疾病易感染相关的主要位点是 DR3 、 DR4、和 B27 等。 5.答案：胸腺依赖抗原（ TD － Ag ）次级 B 细胞产生抗体有下述细胞参加反应。 （1）抗原呈递细胞（ APC ）：主要是单核－居噬细胞类将处理的抗原提呈给 Th 细胞并分泌 IL －1， IL －6 活化 T 细胞。 （2） Th 细胞：经抗原刺激活化后分泌细胞因子，特别是 Th2 细胞分泌 IL －4、 IL － 5、IL －等，除辅 B 细胞活化分化变成浆细胞产生抗体，还有调节抗体产生的作用。 （3）B 细胞：经抗原次级后变成浆细胞合成并分泌抗体， 在对应抗原再次应答时 B 细胞是主要 的抗原提呈细胞（ APC），可处理并提呈抗原给 Th 细胞，使之活化。 （4）非胸腺依赖抗原（ TI － Ag ）直接刺激 B 细胞产生 IgM 类抗体，如脂多糖或肺炎球菌荚膜多糖抗原可直接与 B 细胞表面的 Ig 结合，刺激其分化为浆细胞。 ···

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6. 答案：一般来说，自身物质对自身没有抗原性。在一定条件下，自身物质对自身发挥抗 ···

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原作用，引起免疫应答，称之为自身抗原。 自身抗原产生的原因： （1）隐蔽的自身抗原某些自身物质在正常条件下与血流和免疫系统相对隔绝，称为隐 的自身蔽抗原。外伤、感染或手术不甚等原因，使这些物质进入血流，引起自身免疫应答。例如眼外伤后，眼葡萄膜色素和眼晶体蛋白释放可引起交感性眼炎和过敏性眼炎；精子抗原释放 引起男性不育症；甲状腺球蛋白释放引起变态反应性甲状腺炎；脑脊液和周围神经的髓鞘蛋白的释放引起脱髓鞘脑脊髓炎和外周神经炎。 （2）修饰的自身抗原在病原微生物感染、电离辐射或药物等影响下，自身组织分子改变，形成新的抗原决定簇或暴露出内部的隐蔽的决定簇，成为自身抗原刺激机体产生免疫应答，引起自 身免疫疾病。例如，服用氨基比林或甲基多巴，可改变粒细胞或红细胞表面的化学界构，出现新的抗原决定簇，从而引起粒细胞减少症或自身免疫性溶血性贫血。 7．答案： 抗体能够特异性结合是基于两种分子间的结构互补性与亲和性， 这两种特性是由抗原 与抗体分子的一级结构决定的。抗原抗体反应分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异 性结合阶段，此阶段反应快，仅需几秒钟至几分钟，但不出现可见反应。第二阶段为可见反应 阶段，抗原抗体复合物在环境因素（如电解质， 、 PH 、温度、补体）的影响下，进一步交联和 聚集，表现为凝集、 沉淀、溶解、 补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。 此阶段反应慢， 往往需要数分钟至数小时。 8．答案： HVGR 和 GVHR 的主要区别在于： HVGR 是由宿主体内致敏的免疫效应细胞和抗体 对移植物进行攻击，导致移植物排斥；而 GVHR 是由移植物中的抗原特异性淋巴细胞，即“过路”淋巴细胞识别宿主抗原而发生的一种排斥反应。这种反应不仅导致移植失败，而且还能给 受者造成严重后果。 9．答案： T 细胞亚群检测已作为临床辅助诊断与研究的一种重要手段，对各种疾病如自身免疫病、免疫缺陷病、病毒感染、恶性肿瘤等的发生、发展、临床疗效考核和预后估计都具有极其 重要的意义；对了解机体的免疫状态也有十分重要的意义。 10．答案：（ 1）使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 （2）使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或酶标抗体，这种酶标抗原或酶标抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，令受检标本（测定其中的抗原或抗体）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化形成有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 11．答案：直接 Coomb’ s 试验主要用于检查已吸附在红细胞上的不完全抗体。此试验常用于 新生儿溶血症、自身免疫性溶血症及特发性自身免疫性贫血等检查。间接 Coomb ’s 试验主要用于检查血清中游离的不完全抗体。此试验多用于检测母体 Rh （D ）抗体，可及早发现和避免 新生儿溶血症的发生。亦可对红细胞抗原不相容性输血所产生的血型抗体进行检测。 12．答案：主要操作步骤如下： （1）特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。 （2）加受检标本： 使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结 合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 （3）加酶抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量呈正相关。 （4）加底物： 夹心复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。 13．答案： ELISA 操作注意事项如下： 4～ 5 次加样。在定性测定中有时不强调加样 （1）加样：在 ELISA 中除了包被外，一般需进 行 ···

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量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使 ···

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每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。 （2）孵育：在 ELISA 中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加结合物后，此时反应的温度 和时间应按规定的要求，保温容器最好是水浴箱，可使温度迅速平衡。各 ELISA 板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将平板放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的， 传热容易。如用保温箱，空湿盒应预先放在其中，以平衡温度，这在室温较低时更为重要。加入底物后，反应时间和温度通常不做严格要求。 （3）洗涤：洗涤在 ELISA 过程中虽不是反应步骤，但却是决定成败的关键。洗涤的目的是洗去反应中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰 物质。 （4）显色及终止反应：显色是一步酶促反应，应按规定的温度和时间操作，用酸终止。 （5）结果判断：用比色计测定结果，准确性决定于 ELISA 板底的平整与透明度和比色计的质 量。 14．答案：经过荧光抗体染色的单细胞悬液和鞘液在氮气压力下同时进入流室，形成鞘液包裹 细胞悬液的稳定层流，由喷嘴高速射下（ 1000-5000 个细胞 /S），与垂直而来的激光束交会。在 混合细胞中，由于细胞大小、胞内颗粒多少以及 DNA 含量等不同，使激光产生不同的散射， 分别由散射光检测接受；细胞上着染的荧光染料在激光激发下，辐射出荧光，由荧光检测器接受。所有信号自动传入电子计算机分析处理，以获得检测结果。 ···